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本文建立了等梯度高效液相色谱(HPLC)法定性、定量分析儿茶素,并对儿茶素中主要成分EGCG含量测定方法进行方法学考察。最佳色谱条件为:ODS (5μm,4.6×250 mm)柱,乙腈∶乙酸乙酯∶水(0.05% H3PO4)=86∶12∶2(V/V)为流动相(pH=3.0),流速:0.8 ml/min,紫外检测波长:280 nm。此分析方法简便易行,准确可靠。文中以茶多酚粗品为原料,进行提取富集得到酯型儿茶素(EGCG,GCG,ECG)并将其作为色谱分离纯化样品。采用单因素试验考察了EGCG在分配色谱柱上的分离及纯化条件。确定最佳分离纯化条件:柱床高度为40 cm,流速为5 ml/min,每4 min收集一个馏分,基本实现了儿茶素单体EGCG的有效分离。本实验方法简便,成本低廉,产品纯度均较高,并可实现EGCG一次性克量级以上的制备。工艺放大中,以含EGCG≥60%的茶多酚粗品为原料,在实验室小试的基础上,采用均匀放大的方法,最终实现了EGCG的成功分离纯化。分离纯化条件为:分别以蒸馏水为固定相,乙醚为移动相,洗脱流速为10 ml/min;径高比1∶1 0;每隔30 min收集一个洗脱液。另外,初步探讨了酯型儿茶素的稳定性。本研究经过一次柱层析,即可得到高纯的EGCG,所采用的分离设备经济,方法简便,易于工业化。药学部分重点研究了EGCG的处方和冻干工艺。以外观、含水量和复溶性为指标,经处方筛选和工艺优化后,以25 mg EGCG,200 mg乳糖为赋形剂,规格为2 ml/支,于-40.0℃预冻5 h,-25.0℃升华干燥32 h,再升温0℃解析干燥5 h。对制得的注射用EGCG进行质量研究,内容包括:一般检查项目(澄明度、pH值、水分)、含量测定研究。室温留样3个月和加速试验3个月的初步稳定性考察表明本品稳定。