论文部分内容阅读
卵巢是女性重要的生殖器官之一,卵巢恶性肿瘤是致死率最高的妇科肿瘤,卵巢癌患者死亡人数占女性癌症患者死亡人数的4%。甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是由人甲状旁腺主细胞合成并分泌的重要的多肽类激素,它在体内的主要作用是调节钙磷代谢和骨转换。本文从PTH对卵巢癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和干细胞干性的影响入手,探究PTH在卵巢癌细胞中的作用机制。本研究发现,PTH体外作用卵巢癌细胞SKOV3、ES2后可显著提高细胞的增殖能力。愈伤划痕实验、Transwell细胞迁移实验以及Transwell细胞侵袭实验结果表明,PTH处理后细胞的迁移和侵袭能力显著提高,表明PTH具有促进卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用。检测卵巢癌细胞内EMT标志物的表达水平发现,PTH处理提高了细胞内间质细胞标志物N-Cadherin、Vimentin的表达,上皮细胞标志物E-Cadherin表达量降低,EMT相关的转录因子Twist、Snail的表达量也增加,证实PTH具有促进卵巢癌细胞EMT的作用。微球形成实验和平板克隆形成实验结果表明,PTH处理卵巢癌细胞后,细胞的自我更新能力显著增强,微球形成和平板克隆形成能力显著提高。检测细胞内的干细胞标志物的表达水平发现,干细胞标志物Bmi-1、Sox-2、Oct-4以及转录因子Slug、Nanong表达量均提高,表明PTH增强了卵巢癌细胞的干细胞干性。在原位肿瘤动物模型实验中,PTH处理组的肿瘤体积和重量显著高于对照组,表明PTH在体内具有促进卵巢癌细胞肿瘤形成和促进肿瘤生长的作用。为了探究PTH在卵巢癌细胞中的作用机制,本研究用抑制剂GSI-953阻断Notch3信号通路或用siRNA内源性降低Notch3表达,PTH促进卵巢癌细胞EMT和干细胞干性的作用被减弱或抑制,而阻断其他信号通路则对PTH的作用无显著影响,表明PTH主要通过Notch3信号通路介导发挥作用。综上所述,本研究证实了PTH主要通过Notch3信号通路促进卵巢癌细胞的EMT过程和干细胞干性。