阿司匹林联合活血化瘀中成药治疗冠心病的Meta分析及其联合银杏叶提取物对活化血小板刺激内皮细胞产生炎症反应指标的影响

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冠心病严重威胁着人类的生命健康。阿司匹林在冠心病二级预防中广泛使用。近年来,中国医生也使用一些中成药制剂防治冠心病。因此,本研究包含两个部分内容:1.阿司匹林联合活血化瘀中成药治疗冠心病的临床疗效---Meta分析;2.实验观察阿司匹林联合银杏叶提取物对活化血小板刺激内皮细胞产生炎症反应指标的影响。第一部分:阿司匹林联合活血化瘀中成药治疗冠心病的临床疗效---Meta分析目的:系统评价阿司匹林联合活血化瘀药与单独使用阿司匹林治疗冠心病的临床疗效。方法:计算机检索在PubMed、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)、计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)和中国生物医学文献数据库(CBM)收录的有关阿司匹林联合活血化瘀药与单独使用阿司匹林治疗冠心病临床疗效对比的文献。采用Cochrane系统评价员手册中对RCT的质量评价标准对纳入文献进行质量评价,异质性分析使用χ2检验,二分类变量采用比值比(OR)为效应量进行Meta分析,连续性变量采用均数标准差(Std. mean difference, SMD)进行Meta分析,异质性来源采用Stata 12.0软件进行Meta回归分析。结果:共纳入20篇随机对照试验(RCT),其中18篇是临床治疗心绞痛有效率的,OR为3.19,95%置信区间为2.43~4.19,P<0.00001;11篇是临床治疗心电有效率的,OR为2.61,95%置信区间为1.94~3.51,P<0.00001;16篇是有关降低血脂中胆固醇(TC)水平的,SMD为1.18,95%可信区间为0.69~1.67,P<0.00001;16篇是降低血脂中甘油三酯(TG)水平的,SMD为1.02,95%可信区间为0.50~1.54P=0.0001,;15篇是降低血脂中低密度脂蛋白(LDL)水平的,SMD为1.22,95%可信区间为0.70~1.74,P<0.00001;14篇是升高血脂中高密度脂蛋白(HDL)水平的,SMD为0.88,95%可信区间为0.47-1.28,P<0.0001。结论:阿司匹林联合活血化瘀药治疗冠心病的临床疗效优于单独使用阿司匹林。第二部分:阿司匹林联合银杏叶提取物对活化血小板刺激内皮细胞产生炎症反应指标的影响目的:在本研究中,我们使用活化血小板体外刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells, HCAECs)建立炎症反应模型后,加入治疗量的阿司匹林、银杏叶提取物(Ginkgo biloba Extract, EGB)或者两者联合使用,来探讨两种药物能否起到协同抑制NF-k B表达的作用,以及对IL-6,VAP-1生成的抑制作用。方法:培养人冠状动脉内皮细胞,选取5-7代细胞加入2×108/ml终浓度的活化血小板进行刺激建立氧化应激模型,建模成功后加入药物阿司匹林(1,2或5mmol/L),银杏叶提取物(4,40或400 ug/ml)以及二者联合(1 mmol/L阿司匹林和40 μg/ml EGB),药物干预时间为12小时。收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HCAECs中IL-6, VAP-1的表达量。提取细胞总蛋白,用Western Blot法检测NF-KB(p-p65)蛋白的生成量。结果ELISA结果分析显示,使用活化血小板刺激HCAECs后,和对照组相比,培养基中内皮细胞IL-6,VAP-1的分泌量增加明显(p<0.05);和活化血小板组相比,阿司匹林和EGB对IL-6, VAP-1的表达均有抑制作用,且这种抑制作用呈剂量依赖性(p<0.05);和EGB组或阿司匹林组相比,联合使用阿司匹林+EGB药物干预对IL-6, VAP-1的表达具有协同抑制作用(p<0.05)。 Western blot结果显示,和对照组比较,使用活化血小板刺激HCAECs之后,细胞内NF-k B (p-p65)的表达增加明显(p<0.05);和活化血小板组比较,使用单独药物组对p-p65的表达出现与药物剂量相关的抑制性(p<0.05);和阿司匹林组或者EGB组相比,联合用药对P-P65表达的抑制作用呈现出协同性(p<0.05)。结论:银杏叶提取物和ASP以及联合使用两种药物可能是通过抑制NF-k B (p-p65)的表达来抑制内皮细胞分泌IL-6, VAP-1等炎症因子。
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