河北保定地区PCV2遗传变异及血清抗体水平与病毒血症的关系

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猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)可导致猪免疫功能损伤,其引起的猪圆环病毒相关疾病(PCV2-associated diseases,PCVAD)给世界养猪业造成了重大经济损失。从发现PCV2对猪具有致病性以来,其基因型不断发生变化,迄今至少有PCV2a、PCV2b、PCV2c和PCV2d四种基因型。不同地区流行的PCV2优势基因型存在差异,而且PCV2的致病力与基因型有关。近年来有研究报道河北地区存在PCVd型,但保定地区PCV2的遗传变异特征尚无系统资料。本研究旨在明确保定地区PCV2的遗传变异特征,分析血清PCV2特异性ELISA抗体与病毒血症的相关性,丰富当地PCV2分子流行病学资料,为PCV2的有效防制与免疫效果评价提供参考。  本实验于2015~2016年间从保定地区53家猪场采集了699份血清,16份组织样本,应用PCR扩增PCV2全基因组序列,从来自32家猪场的70份样品中检测到了病毒核酸,选取24份样品进行全基因组序列测序与分析。24条序列中仅1条长度为1768bp,其余23条长度均为1767bp。24条序列间核苷酸序列同源性在95%~99%之间。基于全基因组和PCV2ORF2序列,应用MEGA6.0软件对24条核苷酸序列和氨基酸序列绘制了遗传进化树。24条序列中一条为PCV2a型,一条为PCV2b型,其余22条均为PCV2d型,所占比例高达91.7%。三种流行的基因型在核苷酸和氨基酸序列上均存在较大差异,尤其是ORF2的变异最为显著。将22条PCV2d基因型序列与8条参考序列进行比对,发现在ORF2的167位氨基酸存在甘氨酸(G)或精氨酸(R)的突变,本实验测定的PCV2d序列中有90.9%(20/22)是甘氨酸,而在以往的参考序列中有87.5%(7/8)是精氨酸(R)。该研究结果表明2015~2016年间保定地区流行的PCV2主要为PCV2d基因型,并且PCV2d之间也在发生变化。  应用ELISA和PCR分别检测了368份血清样品的PCV2特异性抗体和病毒核酸,结果抗体阳性率51.36%(189/368),病毒核酸阳性率为17.39%(64/368)。按照抗体水平将检测的血清样品分为六个梯度组,采用Spearman相关分析法,分析每组PCV2阳性率与特异抗体之间的相关性,两者的相关系数-0.464,而P=0.354。结果表明,猪血清中PCV2携带率与特异性ELISA抗体水平之间不相关,提示不能以血清抗体水平来判断猪的病毒血症状态。  综上所述,当前保定地区猪场流行的PCV2有PCV2a、PCV2b和PCV2d三个基因型,其中PCV2d为优势基因型;血清PCV2阳性率与特异性ELISA抗体水平之间无相关性,不能以血清抗体水平来判断猪的病毒血症状态。
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