【摘 要】
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目的研究胚胎干细胞来源的细胞外小囊泡治疗化疗诱导小鼠早发性卵巢功能不全的效果,并进一步探索其可能存在的作用机制。方法本研究通过腹腔注射化疗药物环磷酰胺和白消安构
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目的研究胚胎干细胞来源的细胞外小囊泡治疗化疗诱导小鼠早发性卵巢功能不全的效果,并进一步探索其可能存在的作用机制。方法本研究通过腹腔注射化疗药物环磷酰胺和白消安构建小鼠早发性卵巢功能不全(Premature Ovarian Insufficient,POI)模型。并通过尾静脉注射胚胎干细胞来源细胞外小囊泡(Small Extracellular Vesicles derived from Embryonic Stem Cells,ESCs-sEVs)给予治疗。在治疗后第1周和第2周分别检测小鼠血清雌激素、卵泡刺激素、抗缪勒管激素含量。HE染色评估卵巢结构及卵泡数目,TUNEL染色观察小鼠卵巢颗粒细胞凋亡。提取小鼠卵巢颗粒细胞进行体外培养,给予ESCs-sEVs干预后,通过EdU和CCK-8实验检测颗粒细胞增殖能力。Western-blot检测PI3K/AKT通路及下游凋亡相关蛋白表达情况。结果在应用ESCs-sEVs治疗后,小鼠血清性激素恢复至正常水平,卵巢内各级卵泡数目增加,凋亡颗粒细胞减少。进一步研究发现,ESCs-sEVs干预后颗粒细胞增殖活性提高,PI3K/AKT通路同时被激活,且下游凋亡蛋白Caspase-3及Bax表达降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达增高。而当PI3K/AKT通路被抑制时,ESCs-sEVs对颗粒细胞促增殖和抗凋亡的作用均减弱。结论本研究发现ESCs-sEVs可通过激活PI3K/AKT通路,影响颗粒细胞活性进而促进小鼠卵巢功能恢复,为临床治疗POI提供新的思路和方向。
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