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目的1.通过观察调脂通脉颗粒对ApoE-/-小鼠富含甘油三酯脂蛋白残粒(remnant-like particle cholesterol,RLP-C)水平、主动脉弓细胞黏附分子(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM-l)、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)等蛋白表达的影响,基于NF-κB通路研究探讨调脂通脉颗粒抑制炎症,延缓AS病变的治疗机理。2.通过临床横断面调查研究的方法,分析不同证候类型血脂异常患者血清胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、RLP-C、ICAM-1、VCAM-1分布特点,将中医学宏观证候与现代医学微观指标相结合,寻找理化指标与证候特点的联系,以期为中医药治早期治疗血脂异常及防治AS探索新的思路。方法1.动物实验中将30只6周龄ApoE-/-小鼠随机分模型组、非诺贝特组、调脂通脉颗粒组,每组10只,另选10只6周龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组。正常对照组小鼠每日予普通饲料饲养,模型组每日予高脂饲料饲养,给药组每日予高脂饲料和调脂通脉颗粒或非诺贝特饲养。饲养12周后,生化检测各组小鼠血清TC、TG、LDL-C、RLP-C水平,ELISA法检测ICAM-1、VCAM-1水平;HE染色观察主动脉弓形态学变化;免疫组化法观察主动脉弓ICAM-1、VCAM-1表达;Wester blot法检测主动脉弓 ICAM-1、VCAM-1、NF-κB、p-NF-κB、IκBα、p-IκBα蛋白表达。2.临床研究中筛选2016年5月至2016年12月就诊于北京中医药大学东直门医院和航天中心医院的原发性血脂异常患者,根据相应纳入、排除标准进行病例收集,采集患者的一般资料信息,填写中医证候病例观察表,留取患者晨起空腹静脉血进行检测 TC、TG、LDL-C、HDL-C、RLP-C、VCAM-1、ICAM-1,同时筛选 20 例健康体检者进行对照,最后将采集的数据进行统计分析。结果1.动物实验1)小鼠血脂检测结果表明,与正常对照组比较,模型组TC、TG、LDL-C、RLP-C水平明显升高;而与模型组比较,非诺贝特组、调脂通脉颗粒组血清TG、RLP-C水平明显降低。2)小鼠黏附分子检测结果表明,与正常对照组比较,模型组ICAM-1、VCAM-1水平明显升高;而与模型组比较,非诺贝特组、调脂通脉颗粒组血清ICAM-1、VCAM-1水平明显降低。3)小鼠主动脉弓HE染色结果可见,正常对照组小鼠主动脉内膜光滑,未见炎性细胞浸润。模型组小鼠主动脉可见明显斑块形成,管腔狭窄,斑块内部有大量胆固醇结晶及炎性细胞浸润。非诺贝特组和调脂通脉颗粒组亦可见斑块形成,但斑块内炎性细胞浸润较模型组减少。4)免疫组化结果显示,正常对照组小鼠主动脉弓内皮下未见明显ICAM-1、VCAM-1颗粒。模型组小鼠主动脉弓内皮下可见大量ICAM-1、VCAM-1颗粒。非诺贝特组及调脂通脉颗粒组ICAM-1、VCAM-1颗粒较模型组减少,主要集中于内皮下斑块中。5)Westernblot结果表明,与正常对照组比较,模型组ICAM-1、VCAM-1、p-N、-κB、p-IκBα蛋白表达明显升高;而与模型组比较,非诺贝特组、调脂通脉颗粒组主动脉VCAM-1、p-NF-KB、p-IκBα蛋白表达明显降低;非诺贝特组、调脂通脉颗粒组主动脉ICAM-1表达较模型组虽呈现降低趋势,但无统计学意义。2.临床研究1)临床研究发现,中医证候类型分布比例由高到低依次为:痰浊阻遏证(24.6%)>气滞血瘀证(23.9%)>脾肾阳虚证(21.0%)>肝肾阴虚证(18.1%)>阴虚阳亢证(12.3%)。2)不同证候类型血脂异常患者血脂特点表现为:与正常对照组比较,痰浊阻遏组、脾肾阳虚组、肝肾阴虚组、阴虚阳亢组、气滞血瘀组TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低。其中,痰浊阻遏组较肝肾阴虚组、阴虚阳亢组TG水平明显升高。气滞血瘀组较肝肾阴虚组、阴虚阳亢组TG水平明显升高。3)不同证候类型血脂异常患者RLP-C特点表现为:与正常对照组比较,痰浊阻遏组、脾肾阳虚组、肝肾阴虚组、阴虚阳亢组、气滞血瘀组RLP-C水平明显升高;其中,痰浊阻遏组RLP-C水平最高,较脾肾阳虚组、肝肾阴虚组、阴虚阳亢组明显升高;另外,气滞血瘀组RLP-C水平较肝肾阴虚组、阴虚阳亢组明显升高。4)不同证候类型血脂异常患者黏附分子特点表现为:与正常对照组比较,痰浊阻遏组ICAM-1、VCAM-1水平明显升高;与痰浊阻遏组比较,脾肾阳虚组、肝肾阴虚组、阴虚阳亢组、气滞血瘀组ICAM-1水平明显降低;与痰浊阻遏组比较,脾肾阳虚组、肝肾阴虚组、阴虚阳亢组VCAM-1水平明显降低。5)血脂异常患者血清RLP-C与TC、TG、ICAM-1、VCAM-1呈正相关,与HDL-C呈负相关。结论1.调脂通脉颗粒可能通过降低RLP-C水平,抑制NF-κB途径,减少ICAM-1、VCAM-1表达,延缓AS病变。提示调脂通脉颗粒通过调节血脂代谢,抑制炎症反应,减轻内皮损伤,具有明确的稳定斑块、改善病变、抗AS作用效果。2.血脂异常患者以痰浊阻遏证、气滞血瘀证、脾肾阳虚证最为多见。血清TG、RLP-C、ICAM-1、VCAM-1升高与痰浊阻遏证关系最为密切,可以考虑将TG、RLP-C、ICAM-1、VCAM-1作为痰浊阻遏证的微观辨证指标之一。由于RLP-C对于心血管疾病具有预测价值,提示痰浊阻遏证血脂异常患者可能更易于发生心血管疾病。如果临床实践中遵循辨证论治原则,合理应用益气化痰活血类中药治疗,或许可以使血脂异常患者获得更大的收益。