迎春花总黄酮对慢性非细菌性前列腺炎模型大、小鼠的药效机制研究

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suriq
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目的:研究迎春花总黄酮对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)模型动物的改善效果,并研究迎春花总黄酮对CNP的作用机制。方法:采取摘取双侧睾丸结合苯甲酸雌二醇的手段复制CNP模型小鼠。去势一周后,连续皮下注射苯甲酸雌二醇30天,在皮下注射的同时灌胃给药30天。在第10天、20天、30天给药前称量每只小鼠体重,在给药后的第7天、14天、21天、28天测定每组小鼠日饮水量以及日排尿量,在第30天给药2h之后测定开场活动指标,给药30天后的次日上午,采取眼球取血,将小鼠脱颈椎处死,摘取前列腺、肾脏,称取前列腺与肾脏的重量,计算其脏器指数;将前列腺剪切成两份,一份用来观察白细胞数目和卵磷脂小体密度,一份用来检测前列腺匀浆液中IL-6、IL-8、IgA、IgG、IFN-?和TGF-β的含量;静置分层并离心后的小鼠血清检测TNF-?和IL-1?的含量。采取摘取双侧睾丸结合苯甲酸雌二醇的手段复制CNP模型大鼠。去势一周后,连续皮下注射苯甲酸雌二醇30天,在皮下注射的同时灌胃给药30天。在第10天、20天、30天给药前称量每只大鼠体重,在给药后的第7天、14天、21天、28天测定每只大鼠的日饮水量以及日排尿量,在第29天给药后进行膀胱造瘘手术,在末次给药24h之后,检测大鼠尿动力学指标。膀胱内压检测系统结束后,麻醉大鼠并用腹主动脉的方法采血,处死大鼠,摘取前列腺、附睾、膀胱、肾脏,称取前列腺和肾脏的湿重,计算其脏器指数;将前列腺剪切成三份,一份放入液氮中用Western blot检测P-P38MAPK水平,用Q-PCR检测P38mRNA水平,一份9倍匀浆用来检测匀浆液中IL-2、IL-10、COX-2、MIP-1?、MMP-9、P38MAPK、P-P38MAPK的含量,一份和其他脏器一起放置在4%的甲醛中,制片观察前列腺、膀胱、肾脏和附睾组织形态的变化;静置分层并离心后的血清检测TNF-?和IL-1?的含量。采取在前列腺双侧注射25%消痔灵的手段复制CNP模型大鼠。术后一周,灌胃给药21天,在第10天、20天给药前称量每只大鼠体重,在给药后的第7天、14天、20天测定每只大鼠的日饮水量以及日排尿量,在第21天给药2h之后测定开场活动指标,在末次给药24h之后,麻醉大鼠并用腹主动脉的方法采血,处死大鼠,摘取前列腺、睾丸、附睾、膀胱、肾脏、肝脏,称量前列腺、睾丸、附睾的重量,计算脏器指数;前列腺分成三份,一份用来观察白细胞数目和卵磷脂小体密度,一份用来检测匀浆液中PGE2、BK、LTB4、SOD、MDA的含量,一份和其他脏器一起放置在4%的甲醛中,制片观察组织形态的变化;静置离心后的血清用来检测TNF-?、IL-1?、T和ACP的含量,血浆用来检测TXB2和6-keto-PGF1?的含量。结果:通过观察迎春花总黄酮去势结合雌激素诱导CNP模型小鼠的研究发现,模型对照组小鼠的体重增长变化不大,排尿量和饮水量有所减少,特别是在造模第14天左右明显减少,开场活动测定中运动时间、周边滞留时间、抬腿次数、跨越方格总数都有所增加,血清中TNF-?和IL-1?水平显著增加,前列腺组织中白细胞数目显著增加,卵磷脂小体密度评分大幅度降低,前列腺匀浆液中IL-6、IL-8、IgA、IgG、IFN-?、TGF-?各项含量显著增加。治疗组迎春花总黄酮组小鼠体重、排尿量、饮水量高于模型对照组,开场活动中的各项指标相对减少,白细胞数目减少,卵磷脂小体密度增加,血清和前列腺组织中的各个因子有效得到改善。通过观察迎春花总黄酮对去势结合雌激素诱导CNP模型大鼠的研究发现,模型对照组的大鼠体重明显低于给药组,排尿量和饮水量有所减少,尿动力学指标排尿阈压值升高、排尿间隔时间变短、排尿最大压降低,血清中TNF-?和IL-1?水平显著增加,前列腺匀浆液中COX-2、IL-2、MMP-9、P38MAPK、P-P38MAPK、MIP-1?各项含量显著增加,IL-10含量显著减少,P38mRNA表达量增加,P-P38MAPK蛋白表达水平升高,前列腺与肾脏的脏器指数均降低,前列腺、附睾、膀胱、肾脏出现相应的病理改变。治疗组迎春花总黄酮组的大鼠体重、排尿量、饮水量高于模型对照组,尿动力学中的各项指标相对减轻,血清和前列腺组织中的各个因子有效得到改善,对前列腺、附睾、膀胱、肾脏的病变情况有缓解作用。通过观察迎春花总黄酮对消痔灵诱导CNP模型大鼠的研究发现,模型对照组的大鼠体重明显低于给药组,排尿量和饮水量有所减少,开场活动测定中运动时间、周边滞留时间、抬腿次数、跨越方格总数都有所增加,血清中TNF-?、IL-1?和ACP水平显著增加,T显著减少,血浆中TXB2显著增加、6-keto-PGF1?显著降低,前列腺匀浆液中MDA、PGE2、LTB4、BK各项含量显著增加,SOD含量显著减少,前列腺组织中白细胞数目显著增加,卵磷脂小体密度评分大幅度降低,前列腺、睾丸和附睾脏器指数均增加,前列腺、睾丸、附睾、膀胱、肾脏、肝脏出现相应的病理改变。治疗组迎春花总黄酮组的大鼠体重、排尿量、饮水量高于模型对照组,开场活动的各项指标相对减轻,血清和前列腺组织中的各个因子有效得到改善,对前列腺、睾丸、附睾、膀胱、肾脏、肝脏的病变情况有缓解作用。结论:迎春花总黄酮能够改善CNP模型动物体内抗炎性因子和促炎性因子的水平,增强模型动物的抗氧化能力,缓解血液循环障碍和疼痛反应,减轻模型动物的焦虑行为,减轻排尿障碍,提高全身免疫,同时对P38MAPK信号通路有调节改善作用,说明迎春花总黄酮可以有效缓解炎症症状,治疗CNP。
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