Aβ损伤致PC12细胞AD模型PS1介导的自噬功能研究

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阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年痴呆的主要类型,是一种进行性发展的慢性致死性神经系统退行性疾病,随着社会老龄化的日益严重,已经成为威胁人类健康的第四大杀手,其早诊断、早预防、早治疗是目前全社会关注的焦点问题。β淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)可能是各种原因诱发AD形成和发展的关键因素,Aβ42与Aβ40是体内长链β淀粉样蛋白的主要成分,Aβ42较Aβ40疏水性强,有极高的神经毒性及自我聚集活性,形成不可溶的Aβ纤维体导致老年斑的形成,引起神经元突触的肿胀,功能丧失,最终导致神经元功能障碍致细胞死亡。目前认为,可溶性Aβ寡聚体是产生神经毒性作用的重要来源,比纤维状Aβ毒性更强。但体内可溶性Aβ很难获得,创造其在体内的聚集环境很难实现,但体外分析其变化的动态特征可以实现。自噬是清除异常沉积的β淀粉样蛋白的主要途径,其在阿尔茨海默病疾病的不同时期担任了不同的角色。早老素1(Preselin1,PS1)为调节β淀粉样蛋白生成的关键酶γ分泌酶的主要成分,是溶酶体酸化的关键蛋白。目前的研究结果表明β淀粉样蛋白、PS1及自噬在阿尔茨海默病发生发展过程中所起的作用不尽相同,可能相互影响,机制尚不完全清楚。本研究应用可溶性的Aβ寡聚体诱导PC12细胞制备AD的细胞模型,体外分析Aβ42动态变化时PC12细胞凋亡的发生,PS1、自噬相关蛋白Beclin1、p62的变化及相互关系,可能干预的靶点进行了研究,得出以下结论:(1)Aβ诱导的细胞自噬与Aβ混合物Aβ42/Aβ40的比值显著相关,呈剂量依赖性,可以作为AD早期阶段的研究指标;(2)在一定的浓度范围内,Aβ42诱导细胞自噬的同时不增加细胞毒性,不增加细胞凋亡,为干预AD发生发展的最佳阶段;(3)Aβ42诱导Aβ蛋白的异常沉积与PS1的表达量无关,与其结构及功能异常相关;(4)Aβ42诱导自噬的激活PS1介导的自噬溶酶体清除障碍有关,可以成为AD早期治疗的靶点。
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