目的：光动力疗法（PDT）是光敏剂和特定波长激光之间的非热能光化学反应，在反应的过程中会产生单线态氧及氧自由基，从而对细胞产生不可逆的毒性作用。本研究通过在体外环境下利用菌悬液及构建细菌生物膜模型，初步检测及观察RB介导的PDT（RB-PDT）对牙龈卟啉单胞菌（P.g）的抑制作用，从而为RB-PDT预防和治疗牙周炎的临床应用提供理论及实验依据。方法：（1）应用不同浓度的RB在波长为490nm的LED光源激发作用下，观察其对P.g菌悬液的抑制效果。实验分成两组：对照组（0.9%生理盐水）和PDT组（RB浓度分别为50μM，20μM，10μM，5μM，1μM，共培养5分钟，LED灯光照3分钟）。处理完成后采用十倍稀释法稀释菌悬液后继续培养48小时。菌落计数法得出原菌液的菌落形成单位，并进行统计分析。（2）利用96孔板建立P.g的48小时成熟生物膜模型，采用MTT法检测RB-PDT组（50μM），单纯光照组，单纯RB组及生理盐水组作用后P.g生物膜的吸光度值，比较各组之间的差异；（3）使用激光共聚焦专用培养皿建立P.g的48小时成熟生物膜模型，采用SYT09/PI荧光染色剂使细菌着色，利用激光共聚焦显微镜（CLSM）观察各药物处理组（RB-PDT组（50μM），单纯光照组，单纯RB组及生理盐水组）生物膜中细菌染色情况及死菌活菌比例。结果：（1）菌落平板计数法显示RB-PDT组(RB浓度分别为50μM，20μM，10μM，5μM，1μM)与生理盐水对照组相比，P.g菌落数（CFU/ml）有显著减少（P＜0.05），且五个不同浓度的RB-PDT组之间相互比较发现P.g的菌落数随着RB浓度的增加而减少；（2）MTT检测结果显示RB-PDT组（50μM）与单纯光照组，单纯RB组及生理盐水组比较差异均有显著性（P＜0.05），而单纯光照组，单纯RB组及生理盐水组之间差异无显著性（P>0.05）；（3）CLSM图像显示RB-PDT组可见P.g菌体染色以红色（死菌）荧光为主，仅少量菌体染色为绿色（活菌）荧光，同一视图叠加后以红色荧光为主，而单纯光照组，单纯RB组及生理盐水组镜下菌体菌体染色以绿色（活菌）荧光为主，仅少量菌体染色为红色（死菌）荧光，同一视图叠加后以绿色荧光为主。结论：（1）RB-PDT对P.g菌悬液具有明显的抑制和破坏作用，且RB-PDT的抑制作用有浓度相关性；（2）P.g的菌斑生物膜构建成功，RB-PDT对P.g菌斑生物膜具有明显的抑制和破坏作用；单纯光照组和单纯RB组对P.g生物膜无明显抑菌作用。