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固体培养基灭菌通常采用高压蒸汽灭菌方法,存在灭菌时间长、不能实现生产线连续生产等问题。本研究以枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372)为指示菌,利用家用800w微波炉对固体培养基进行微波及微波—过氧化氢联合灭菌试验,研究微波灭菌的工艺参数,评价灭菌效果,进行金龟子绿僵菌培养试验来探讨微波灭菌对固体培养的影响,为工业化微波灭菌提供参考。 (1) 固体培养基微波灭菌 微波灭菌设负载、水分和浸润三个因素,结果表明:随负载量的增加,杀菌速度降低;含水量和浸润显著影响灭菌效果。微波灭菌的最佳条件为:100g固体培养基加60g水,浸润3h,微波处理150s。 (2) 固体培养基微波—过氧化氢联合灭菌 微波—过氧化氢联合灭菌,设浸润时间、过氧化氢浓度、料水比例、微波处理时间4个因素,选用L8(27)正交实验表安排实验。结果表明最佳灭菌参数为:100g固体培养基加60g水,过氧化氢质量分数为1.0%,浸润3h,微波处理90s。 (3) 微波灭菌对固体培养的影响 在微波灭菌后的固体培养基上接种培养金龟子绿僵菌,以单位质量固体培养基中金龟子绿僵菌的产孢量作为检测指标,探讨微波灭菌对固体培养的影响。结果表明:最佳处理工艺微波灭菌对固体培养无影响,绿僵菌产孢量与高压蒸汽灭菌培养基上的产孢量无显著差异。微波处理固体培养基120s或过氧化氢质量分数1.0%,微波处理90s,接种培养绿僵菌能够正常生长和产孢。