葡萄试管苗微型嫁接组织学、病毒的转运及检测研究

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葡萄是全球也是中国的重要果树植物之一。葡萄卷叶病是影响葡萄产量和品质最严重的病毒病害之一,在世界葡萄种植区域广泛发生,在中国葡萄产区也普遍存在。葡萄卷叶相关病毒-3(GLRaV-3)是引起葡萄卷叶病(GLRD)的主要病毒。已有的研究表明,GLRaV-3抑制葡萄的生长,降低光合作用,导致葡萄产量和品质显著下降。病毒检测是生产无毒苗和检疫的必备技术。葡萄卷叶病毒检测常用的方法包括酶联免疫法(ELISA),反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及指示植物法。其中,指示植物法是目前检测葡萄卷叶病最为有效、可靠的方法。本研究以无毒和感染葡萄卷叶病毒-3的赤霞珠以及湖南1号和霞多丽为试材,利用试管微型嫁接技术研究接穗-砧木的组织学变化与病毒转运,获得的主要结果如下:1.在无毒接穗-感病砧木组合中,接穗的萌发明显快于砧木,嫁接3d时,接穗-砧木的愈伤组织开始形成,7d时,两者的愈伤组织基本融合,但健康接穗中未检测到病毒,14d时,维管束开始连通,健康接穗的感病率为到53.3%,21d时,维管束完全连通,健康接穗的感病率达到100%。2.在带毒接穗-无毒砧木组合中,砧木的腋芽明显快于接穗,,不定根形成快,发育良好接穗-砧木的组织学变化与无毒接穗-感病砧木组合基本一致。但嫁接7d时,无毒砧木的带毒率为36.7%,14d时,无毒砧木的带毒率达到100%。3.白色品种嫁接感染病毒之后,在胁迫培养基上,病毒的含量与控制花色苷合成的基因表达成正相关的关系。本研究首次报道了在葡萄微型嫁接中,接穗与砧木的组织学变化及病毒的转运效率,为葡萄卷叶病毒的试管指示植物检测提供了理论依据,同时为后续微嫁接检测葡萄卷叶病-3提供了技术支撑。
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