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研究目的近年来经皮血管内支架成形术(percutaneous transluminal angioplasty and stenting,PTAS)成为强化药物治疗无效的脑动脉狭窄的重要治疗手段。既往研究表明支架内再狭窄(in-stent restenosis, ISR)是影响PTAS远期疗效的最主要因素,问题是目前缺乏预防ISR行之有效的防治措施。人尿激肽原酶(human urinary kallidinogenase, HUK)是一种组织激肽释放酶,临床广泛应用于缺血性卒中的治疗。已有研究显示人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein, hTK)基因转导可显著减轻球囊拉伤诱导的血管内膜过度增生；然而迄今为止尚缺乏HUK对血管损伤后内膜增生的研究。本研究采用兔颈动脉球囊拉伤模型,观察HUK对内膜增生和动脉粥样硬化斑块形成的影响,探讨其潜在的作用机制。方法36只雄性新西兰大白兔随机分为3组,阴性对照组、模型安慰剂对照组和模型HUK治疗组。后两组高脂饮食2周后行右侧颈动脉球囊拉伤术,术后经耳缘静脉分别给予生理盐水和HUK (0.02 PNAU/d)。收集球囊拉伤术前,术后7、14、28天4个时间点的静脉血,采用自动生化分析仪测定血清中总胆固醇(total cholesterol, TC)和甘油三酯(triglyceride, TG)。术后7、14和28天处死家兔并采集右侧颈总动脉。采用石蜡切片HE染色观察动脉内膜增生情况；免疫组织化学染色观察巨噬细胞聚集和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)的迁移增殖情况；采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件计算内膜／中膜面积比例(intimal area/media area ratio, I/M ratio)、巨噬细胞阳性面积百分比以及SMCs的积分光密度值。采用实时定量PCR检测转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)、肿瘤坏死因子-a (tumor necrosis factor-a,TNF-a)和白介素-1β (interleukin-β1, IL-1β) mRNA的表达；Western blotting检测内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)、磷酸化eNOS以及TGF-β1 Smad2/3通路蛋白表达水平。结果与阴性对照组相比,模型安慰剂对照组的内膜显著增生,可见明显巨噬细胞聚集浸润,并伴泡沫细胞形成。HUK治疗明显减轻内膜增生和动脉粥样硬化斑块的形成,减少血管损伤部位巨噬细胞粘附和浸润、炎性因子的释放以及VSMCs的迁移增殖。血管损伤后,TGF-β1和磷酸化Smad2/3蛋白水平明显增高,HUK干预显著降低TGF-β1和磷酸化Smad2/3蛋白水平,并促进eNOS的磷酸化。结论HUK可减轻球囊拉伤术后血管壁的炎症反应,缓解巨噬细胞的粘附和浸润,下调TGF-β1和磷酸化Smad2/3的表达,促进eNOS的磷酸化,抑制VSMCs从中膜向内膜的迁移增殖,进而抑制内膜的增生。