目的:观察化瘀通络灸对VD模型大鼠脑区神经血管单元相关蛋白的影响,从而探讨化瘀通络灸治疗血管性痴呆的作用机制。方法:随机分出假手术组大鼠15只后,采用改良两血管阻断(2-VO)法制备VD动物模型,模型鉴定成功后随机将大鼠等分为模型组、艾灸组、西药组,每组15只。艾灸组取化瘀通络灸法进行治疗,每穴每日灸20min,西药组每日予腹腔注射鼠神经生长因子,剂量为1.8μg/kg,两组均每周治疗7次,一周为一个疗程。三个疗程后利用Morris水迷宫检测各组大鼠空间记忆能力的变化。利用同样的造模与分组方法,将大鼠分为假手术组、模型组、艾灸组、西药组后,进一步分为1疗程、2疗程、3疗程三个亚组,每亚组12只。采用免疫组化和免疫蛋白印迹法检测不同时间点,化瘀通络灸对VD大鼠海马内Nestin、DCX、CD34、Collagen IV蛋白表达的影响。结果:1)Morris水迷宫检测三个疗程治疗结束后大鼠行为学结果:与假手术组相比,模型组、艾灸组、西药组大鼠游泳速度相互间无统计学差异(P>0.05);模型组大鼠四天逃避潜伏期平均值延长,差异有统计学意义(P<0.01);模型组大鼠穿越平台次数减少(P<0.01);模型组第一次穿越平台时间明显延长(P<0.01),艾灸组与西药组第一次穿越时间延长(P<0.05)。与模型组相比,艾灸组、西药组大鼠逃避潜伏期平均值均明显缩短(P<0.01);艾灸组、西药组穿越平台次数均有所增加,且有统计学意义(P<0.01、P<0.05);艾灸组、西药组第一次穿越平台时间缩短(P<0.05)。与西药组相比,艾灸组大鼠逃避潜伏期平均值、穿越平台次数、第一次穿越平台时间均无明显差异(P>0.05)。2)神经血管单元相关蛋白表达情况:免疫组化与Western blot结果共同显示:Nestin、DCX、CD34一疗程结束时,与假手术组、模型组相比,艾灸组与西药组表达均明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。二疗程结束时,Nestin、CD34艾灸组与西药组表达量至峰值。三疗程结束时,DCX艾灸组与西药组表达量至峰值。Collagen IV一疗程结束时,与假手术组相比,模型组表达减少(P<0.01),其中Wb显示与模型组相比,艾灸组与西药组均有明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。三疗程结束时,Collagen IV艾灸组与西药组表达量至峰值。结果表明,化瘀通络灸能够明显提高Nestin、DCX、CD34、Collagen IV蛋白的表达。结论:1)化瘀通络灸能够改善VD大鼠空间记忆能力。2)化瘀通络灸可能是通过调节神经血管单元相关蛋白,上调Nestin、DCX表达,从而发挥促进神经元增殖、分化迁移的作用;上调CD34的表达,进而协助血管新生;上调Collagen IV表达以维持血脑屏障的生理功能,进而发挥稳定整个神经血管单元平衡的作用,纠正VD空间记忆功能障碍。