金属免疫分析是基于金属标记物的一类免疫分析方法。早期的金属免疫分析多是通过用金属螯合物来标记抗原或抗体,由于一个蛋白质分子只能标记上少数几个金属螯合物,因此这类方法的灵敏度受到很大的限制,通常只能达到nmol级。为了克服这一缺点,本文提出了一种新的基于胶体金标记的阳极溶出伏安免疫分析方法。本论文从以下四个部分发展了这种分析方法。 在第一章中,描述了现代免疫分析的发展趋势,胶体金以及基于胶体金标记的免疫分析方法的发展及最新技术。 由于胶体金能催化银离子的还原,因此通过银染色放大可在金表面催化沉积大量的金属银,用酸性溶液将银溶解后可释放出成千上万的银离子。所以在第二章中提出了一种新的、高灵敏的基于银增强放大和免疫胶体金技术的血吸虫抗体的免疫分析方法。免疫反应在聚苯乙烯微孔板中以间接分析模式(血吸虫抗原—兔抗血吸虫抗体—胶体金标记的羊抗兔IgG二抗)进行,通过反应上去的胶体金催化银离子的还原,使大量的银沉积在胶体金的周围,用酸将银溶解后,通过阳极溶出伏安法(ASV)对银离子进行检测,溶出峰电量的大小与待分析物兔抗血吸虫抗体的浓度成正比。 在第三章中,免疫反应在聚苯乙烯微孔板中以夹心分析模式进行,通过物理吸附将免抗人免疫球蛋白G(IgG)抗体固定于微孔板上,与相应的IgG抗原发生免疫反应后,再通过夹心模式捕获相应的胶体金标记的羊抗人IgG抗体,然后再与金标羊抗人IgG抗体和金标兔抗羊二抗形成的免疫复合物反应,在微孔板上进一步引入大量的胶体金,将金溶解后,在碳糊电极上用阳极溶出伏安法(ASV)对金离子进行检测,溶出峰电流的大小间接与待分析物IgG抗原的浓度成正比。将该方法应用于人血清中IgG浓度的测定,取得了满意结果。 在第四章中,通过金标羊抗人IgA抗体与金标兔抗羊二抗形成的免疫复合物,在微孔板的表面引入大量的胶体金,用适当溶液溶解后