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目的:根据全基因组序列异原性≧8%或者S区DNA检测异原性≧4%,将乙型肝炎病毒(HBV)共分为A~H共8个基因型,基因型的分布具有明显的地区性差异,且与临床表现、疾病进展及治疗和预后有一定的相关性。本研究的目的是掌握河北省石家庄地区乙型肝炎病毒基因型别分布情况,为乙型病毒性肝炎的治疗和预后提供参考依据。
方法:
1、选择石家庄地区的国家乙肝防治项目县,行唐县、灵寿县、元氏县、赵县、藁城市和鹿泉市等6个县作为试验县,对通过国家“疾病监测信息报告系统”报告的乙肝病采集血清,用ELISA方法检测HBsAg和抗-HBcIgM抗体。
2、用多对型特异引物巢式PCR的方法检测石家庄地区112例HBsAg阳性乙型病毒性肝炎病例HBV DNA基因型别。
3、据处理和统计采用采用Excel和SPSS14.0软件进行数据整理和统计学分析。
结果:
采用型特异性多引物巢式PCR检测112例基因型,109例被确定型别,占97.32%,共检测出A、B、C、D、E和F等6个基因型。其中B基因型1例(0.89%),C基因型85例(75.90%),B+C混合型8例(7.14%),B+C+D混合型1例(0.89%),B+C+F混合型1例(0.89%),C+D混合型5例(4.47%),C+E混合型3例(2.68%),C+F混合型4例(3.57%),A+F混合型1例(0.89%),未分型3例(2.68%);C基因型为优势型别。混合基因型类型较多,与未分型合计共26例,占23.21%。
在61例临床诊断为慢性乙型病毒性肝炎患者中,C基因型有50例,占81.97%,B基因型1例占1.64%,C+B混合型3例占4.92%,C+D混合型2例占3.28%,C+E混合型2例占3.28%,C+F混合型1例占1.64%,未分型2例占3.28%。
18例急性乙型病毒性肝炎中,C基因型感染8例,占44.44%,C+B混合型2例占11.11%,C+B+D混合型1例占5.56%,C+B+F混合型1例占5.56%,C+D混合型1例占5.56%,C+E混合型1例占5.56%,C+F混合型2例占11.11%,A+F混合型1例占5.56%,未分型1例占5.56%。
结论:
1、采用型特异性多引物巢式PCR方法,从石家庄地区乙肝病例标本中共检测出A、B、C、D、E和F等6个基因型,C基因型为优势基因型。
2、慢性乙型病毒性肝炎病例C基因型的比例明显高于急性乙型病毒性肝炎病例,混合基因型感染病例占一定比例,增加了预防和控制HBV感染的难度。
3、用基因型特异性多引物巢式PCR分型法对HBV进行基因分型,操作简单,结果易判定,适合大规模样本的检测。