化浊解毒软坚方对H22肝癌荷瘤小鼠IL-6和STAT3表达的影响

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目的:通过观察化浊解毒软坚方对H22肝癌荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用及对肿瘤组织中IL-6、STAT3表达的影响,探索化浊解毒软坚方抗肿瘤的相关作用机制,为化浊解毒软坚方在临床的应用提供一定的实验依据。方法:选用清洁级健康KM小鼠40只,按体重随机抽取8只作为空白对照组,剩余32只小鼠右腋下注射H22肝癌细胞悬液建立H22肝癌模型。造模成功后,将32只造模小鼠随机分为4组:模型组、化浊解毒软坚方组(中药组)、5氟尿嘧啶组(西药组)、化浊解毒软坚方联合5氟尿嘧啶组(联合组),每组8只。给以相应的药物干预,连续7天。干预治疗结束后,小鼠禁食不禁水12小时以上,用脊髓脱臼法处死小鼠,钝性剥离肿瘤组织并称重,以10%中性甲醛液固定肿瘤组织待免疫组化法检测肿瘤组织中白介素-6(IL-6)、信号传导蛋白和转录激活物3(STAT3)的表达水平,将剩余的新鲜组织放入冻存管,用Western Blot方法检测肿瘤组织中IL-6、STAT3的表达水平。结果:1.各组小鼠一般情况与空白组小鼠相比,各组荷瘤小鼠均不同程度出现精神萎靡不振、活动减少、反应迟缓、皮毛欠光泽、进食减少等表现,其中模型组小鼠的表现最为明显。治疗组之间相比来看,联合组的精神状态、进食、活动度等表现优于其余的治疗组;中药组小鼠的精神状态、灵敏度、进食等表现比西药组小鼠较好。2.各组荷瘤小鼠肿瘤生长抑制情况三个治疗组相比,联合组的抑瘤率最高,其次为西药组、中药组;各组平均瘤重相比较,联合组平均瘤重最小,其次为西药组、中药组、模型组;三个治疗组的平均瘤重均小于模型组,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);联合组下降的最为明显,与西药组、中药组相比有统计学意义(P<0.05);中药组与西药组之间相比较,二者差异无统计学意义(P>0.05)。3.各组荷瘤小鼠肿瘤组织IL-6、STAT3表达水平的比较3.1肿瘤组织中IL-6表达水平的比较治疗组各组肿瘤组织中IL-6的阳性表达率、最后灰度值均低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组之间来看,联合组的阳性表达率、最后灰度值下降最为明显,与中药组、西药组均有统计学差异(P<0.05);而中药组与西药组之间相比,二者无统计学差异(P>0.05)。3.2肿瘤组织中STAT3表达水平的比较治疗组各组肿瘤组织中STAT3的阳性表达率、最后灰度值均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);其中,联合组下降最为明显,与西药组、中药组均有统计学差异(P<0.05);而中药组与西药组之间相比,二者无统计学差异(P>0.05)。结论:1.化浊解毒软坚方可以有效抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,并可改善荷瘤小鼠的一般情况、降低肿瘤重量以及提高抑瘤率。2.化浊解毒软坚方可以有效改善肿瘤的炎性微环境,从而下调IL-6水平,进一步抑制STAT 3在瘤体中的表达,从而发挥抑制荷瘤小鼠肿瘤生长的作用。
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