【摘 要】
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目的 初步探讨靶向干扰AURKA表达对骨肉瘤U2-OS细胞生长的影响及机制方法 1、脂质体瞬时转染AURKA-siRNA处理骨肉瘤细胞U2-OS后,采用实时荧光定量PCR方法及Western blot检测s
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目的 初步探讨靶向干扰AURKA表达对骨肉瘤U2-OS细胞生长的影响及机制方法 1、脂质体瞬时转染AURKA-siRNA处理骨肉瘤细胞U2-OS后,采用实时荧光定量PCR方法及Western blot检测siRNA序列的有效性,CCK8实验检测干扰AURKA表达后细胞活力变化,BrdU细胞增殖实验检测干扰前后细胞增殖情况,流式细胞周期检测干扰前后细胞周期改变,细胞免疫荧光检测干扰前后细胞有丝分裂不稳定事件,Western blot检测相关周期蛋白表达;2、不同浓度AURKA抑制剂VX-680单独及VX-680联合顺铂处理骨肉瘤细胞U2-OS,MTT法检测细胞增殖变化情况,Western blot检测相关周期蛋白的表达。结果 1.U2-OS细胞转染AURKA-siRNA后细胞增殖受到抑制,且存在G2/M期阻滞,有丝分裂过程中的有丝分裂不稳定事件发生率降低,下调AURKA后可使Cyclin B1表达增加,CyclinD1表达降低;2.VX-680联合顺铂处理骨肉瘤细胞U2-OS后,对细胞生长有明显的抑制作用,且具有时间和剂量依赖性。结论 抑制AURKA表达后可抑制骨肉瘤细胞增殖,并可增加骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性。
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