【摘 要】
：
该研究将已克隆的真菌细胞色素P450nor基因插入原核表达质粒载体pRSET和pET28的BamHI/Hind Ⅲ位点,成功构建重组表达质粒pRT- p450nor和pET- p450nor,并转化到EcoliBL21.为了
论文部分内容阅读
该研究将已克隆的真菌细胞色素P450nor基因插入原核表达质粒载体pRSET和pET28的BamHI/Hind Ⅲ位点,成功构建重组表达质粒pRT- p450nor和pET- p450nor,并转化到EcoliBL21.为了提高重组蛋白的表达量,对诱导表达时的温度及IPTG的浓度进行优化.结果表明:最佳诱导温度为30℃,而IPTG的浓度变化对重组蛋白的表达量影响不大.确定诱导条件为30℃诱导,IPTG浓度为1mmol/L.重组表达质粒pRT- p450nor和pET- p450nor经IPTG诱导后,在EcoliBL21中实现了高效表达,SDS- pAGE分析显示表达产物的分子量为44KD.在此条件下,大规模诱导表达重组细胞色素P450nor,经DEAE纤维素色谱柱纯化,SDS- pAGE分析表明,纯化的目的蛋白基本上为单一谱带,纯化达到预期效果.利用表面等离子模共振技术(SPR)进行生物特异性相互作用分析(BIA )己成为现代基因工程技术中的一种先进的手段.与传统的研究方法如酶联免疫吸附测定(ELISA )相比,它具有方便快捷、灵敏度高、应用范围广、实时监控等多项特点.利用这种新型研究手段对于生命科学的基础研究、医学诊断以及治疗等方面有着十分重要的意义.SPR生物传感器的高灵敏性,以及生物大分子间反应的高度特异性,使不需要严格纯化而直接检测目的蛋白与抗体间的反应成为可能.我们引入这项技术,利用自组装的SPR生物传感器,以乙肝表面抗原为样品,建立和优化这种检测方法,探讨检测过程中的种种影响因素,为检测初步纯化的目的蛋自P450nor与抗体的相互作用奠定了基础.
其他文献
心肌Cl通道除了与心肌细胞的电活动有关外,我们初步的研究结果提示Cl通道在心肌中还可能有调节Ca通道的作用.在此基础上,该文就Cl通道与Na通道之间的可能关系进行了研究.实验
该实验以透射电子显微镜为实验手段,以日本弓背蚁为实验材料,对其触角叶嗅觉纤维球的组织结构、形态特征进行了观察分析.此外,采用环氧树脂Epon812常规包埋方法对其触角叶进
真核生物的基因在大肠杆菌中的高效表达是蛋白质功能研究,结构生物学研究,以及生物技术制药的重要环节.自1974年首次实现真核生物的基因在大肠杆菌中的表达以来,虽然已积累了
生物教学的最终目标是让学生学有所用,学以致用,更好地指导生活与实践。本文阐述了在高中生物学教学中,充分利用教材内容,培养学生科学、健康生活观念的问题。
The ultimate
为了提高电力电子设备绝缘材料的介电性能,对绝缘材料掺杂纳米颗粒进行改性是一种有效的方法。本论文以聚酰亚胺(PI)为聚合物基体材料,研究Al_2O_3掺杂含量对聚酰亚胺复合薄膜陷阱能级分布的改变,并且以陷阱特性为出发点,重点研究陷阱特性对其电性能的影响,揭示聚酰亚胺复合薄膜电性能的微观机理。采用原位聚合法制备不同组分的PI/Al_2O_3纳米复合薄膜,厚度均为30μm左右。利用扫描电镜、傅里叶红外光
摘 要： 生物学科是一门以观察和实验为基础的自然学科，在高中生物教学中，实验教学在其中占据着相当重要的分量。在实验教学中，分为演示实验和学生分组实验两大类，其中分组实验是由学生亲自操作独立完成的实验，因此它对培养学生的实验操作能力和自主学习能力具有积极的作用。作者结合了在学生分组实验教学中遇到的一些问题，就如何有效开展学生分组实验提出了一些看法，希望为生物实验教学质量的提升和学生综合素质的培
目的:鸡腿蘑,钒、铬等微量元素,黄芪、大黄等中药都有降血糖作用.鸡腿蘑含有调节血糖的成分,钒有类胰岛素作用,铬是葡萄糖耐量因子的重要成分.它们的降糖机理不同,单独应用时
摘 要： 高职院校学生的学习习惯普遍很差，课前不预习，课后不复习，课堂不听讲，以致学习效果很不尽如人意。化学是一门自然科学，其教学的最终目的就是促进学生思维的发展，目前一些教师的课堂提问却无法有效地对学生的思维起到引领作用，偏离了教学的“终点”。一个准确、生动、有效的课堂提问，往往能激起学生的学习兴趣，使学生积极思考问题，寻找解决问题的方法和答案，从而有效地提高化学课堂学习效率。 关键词：
摘 要： “问题意识”教学不是一种静态的方法，而是提出问题—解决问题的动态过程。学生在教学过程中，获得广泛的活动经验，这有利于培养合作意识、自主学习能力、创新意识和实践能力，也有利于提高教学质量。这种教学符合新课程的理念，易于操作。本文具体分析在高中生物教学中，“问题意识”教学的实施策略及必须遵循的集体性原则。 关键词： 新课改 问题意识 高中生物教学 实施策略 集
我们常常引用一句话：听来的东西，我很容易把它忘记；看到的事情，我可能把它记住；自己亲自参与的事情，我会永久记住。这告诉我们，只有学生亲身体验了，才会真正理解，掌握的更牢。《数学课