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阿尔茨海默症是认知、调控能力逐渐改变的一种神经性疾病,目前尚未有有效的医学治疗手段,治愈阿尔茨海默病已成为全世界攻克的难题。传统医学认为,阿尔茨海默症的病因由多种因素引起,多为肾气虚衰,致髓海不足,脑髓空虚而使脑组织萎缩、功能减退而致呆痴,故补肾益精填髓是治疗之根本。骨碎补（Drynaria fortunei）是传统补肾良方,临床上常用于治疗老年记忆衰退。现代药理学表明,骨碎补中黄酮类化合物是改善记忆功能的主要活性成分,故本实验筛选优化了骨碎补总黄酮的富集工艺,并考察了骨碎补总黄酮对A?25-35诱导损伤的PC12细胞的保护作用。首先,建立骨碎补总黄酮的紫外定量分析方法,以柚皮苷标准品为对照品,考察精密度、稳定性、重复性、回收率,用于评价和优化骨碎补总黄酮的富集工艺。其次,分别考察50%、55%、60%、70%、80%乙醇对总黄酮的提取效果,确定55%乙醇为最佳提取溶剂。考虑到工业化生产可行性,最终选择乙醇加热回流作为总黄酮的提取方法。采用L9（34）正交试验法对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数四因素进一步的综合考察,从而确定骨碎补总黄酮的最佳提取工艺:55%乙醇为提取溶剂,14倍体积的生药量,加热回流提取3次,每次1.5h。通过考察树脂吸附性、解吸性等性能,最终确定AB-8型树脂为最佳大孔树脂。以单因素实验和正交试验法,优化出骨碎补总黄酮的最佳富集工艺:AB-8型大孔树脂20 g,径高比1:5,吸附10 m L(20 mg.L-1)的总黄酮水溶液（p H=4.0,20℃）24 h,分别用8BV的水和50%8 BV的乙醇以1.0 m L/min流速进行洗脱,收集合并50%乙醇洗脱液,经减压浓缩后得骨碎补富集物。富集物中骨碎补总黄酮的含量为76.11%,总黄酮转移率78.82%,柚皮苷含量为20.41%,柚皮苷转移率为76.53%。最后,将Aβ25-35诱导后的PC12细胞做为阿尔茨海默症体外细胞模型,并将纯化后不同浓度的骨碎补总黄酮作用于细胞模型上。利用MTT法检测出最佳药物作用浓度,2×10-7 g/m L骨碎补纯化物对Aβ25-35诱导损伤的PC12细胞保护作用最强,在该浓度下作用于Aβ25-35诱导损伤的PC12细胞,检测细胞存活率。实验得出在浓度为2×10-7 g/m L的给药组中细胞的增殖率显著升高（P<0.01）,其细胞增殖率达到93%。说明纯化后的骨碎补总黄酮对损伤后的PC12细胞具有一定的保护作用。本实验建立了骨碎补总黄酮定量分析方法,通过方法学考察证明其准确性、重复性及稳定性良好,可用于骨碎补中总黄酮的含量测定;优化了骨碎补中总黄酮有效部位的最佳提取、富集工艺,方法简单可行性强,富集物中总黄酮类成含量较高、总黄酮转移率较好。体外细胞实验证实骨碎补总黄酮具有保护的中枢神经作用,骨碎补总黄酮对治疗阿尔茨海默病具有极大的潜在药用价值。