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选择不同提取剂对斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白进行制备,优化酸法提取工艺,并对胶原蛋白进行了部分定性研究。实验结果表明,4℃条件下,鮰鱼皮先用0.1MNaOH浸泡6小时再用2.5%NaCl浸泡6小时,比单独或同时使用NaOH、NaCl能更好的去除杂蛋白,低浓度的NaOH溶液去除杂蛋白时不会造成胶原大量降解,一定浓度的NaCl可以使鱼皮中的杂蛋白析出,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,再用0.1M柠檬酸浸提3天能较好的提取鲴鱼皮胶原蛋白,无色无味,提取率可达34.67%。获得的胶原蛋白中甘氨酸含量丰富,质量分数为21.19%,其变性温度为50.2℃。SDS-PAGE实验结果表明,提取的鮰鱼皮酸溶胶原具有较高的纯度,含有两条α链,β链含量较高。鱼皮胶原蛋白溶液具有较高的粘度,其随着蛋白浓度的增大而增大。
酸溶性胶原蛋白在提取过程中发生一定的降解,生物活性发生破坏,相对分子量较低,应用范围不广,针对这一问题,采用正交试验研究了去除斑点叉尾鮰鱼皮非胶原成分的优化工艺,建立了一种采用低温热溶法制备相对分子质量较高的鱼皮胶原蛋白的方法,其工艺为,4℃条件下,先用1.0%的活性炭去除鱼皮附着色素,再采用料液比为1:40的0.3mol/LNaOH浸泡搅拌6小时后,再用料液比为1:20的5%NaCl浸泡搅拌6小时去除杂蛋白,然后用料液比为1:30的异丙醇溶液浸泡24h去除脂肪,将去除非胶原的鲴鱼皮经10℃以下真空干燥,得到胶原蛋白粗制品。将该粗制品在水中缓慢升温至70℃(3小时内),溶解后用脱脂纱布过滤,去除不溶性色素蛋白,得到澄清的胶原蛋白溶液,胶原蛋白含量为75.056%。用该法提取的鲴鱼皮胶原蛋白相对分子量大,变性温度为27.9℃,粘度高于酸溶性胶原,凝胶强度好,应用范围广,生产时间短,操作方面,成本低。
鮰鱼鱼骨也可以作为提取骨胶原的原料充分利用,鱼骨中蛋白质的存在会影响骨钙的吸收,将鱼骨中的胶原蛋白用不脱钙的方法提取出来并加以利用,钙质保留在骨中有待开发高钙食品,既充分利用了鱼骨中的蛋白质成分,又使高钙成分利于吸收,可以实现资源利用上憧憬的“零废弃”。实验选择了不同提取剂对斑点叉尾鮰鱼骨胶原蛋白进行提取,并对其进行了部分定性研究。实验结果表明,在4℃条件下,鲴鱼鱼骨先用0.1mol/L的NaOH浸泡6小时再用2.5%NaCl浸泡6小时,比单独或同时使用NaOH、NaCl能更好的去除杂蛋白,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,0.1mol/L的柠檬酸浸提3天能较好的提取胶原蛋白,无色无味,提取率可达11.87%。粗提液再经盐析、透析可得到纯度较高的胶原蛋白制品。鱼骨胶原蛋白溶液的粘度随着蛋白浓度的增大而增大,其变性温度为33.9℃。SDS-PAGE实验结果表明,提取的鲴鱼骨胶原具有较高的纯度,含有两条α链,β链含量较高。提取胶原后的鲴鱼骨粉中钙含量高达60%,作为钙添加剂加到饼干中,不会对饼干的口感和味道造成显著性差异,是良好的钙添加剂,可用于食品再加工。