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目的:显微捕获联合低体积扩增(Low volume polymerase chain reaction,LVPCR)技术进行细胞分离检验为法医混合微量生物检材的检验提供了有效途径,但法医实践检案的检材细胞质量良莠不齐,又含杂质干扰等,致使镜下目的细胞的辨识成为检验结果好坏的关键环节之一。本研究基于显微捕获仪平台,应用组织学染色的原理,初步建立一种适用于显微捕获联合LVPCR的细胞标识方法,并评价在法医实际应用的效果。方法:取10名志愿者的口腔拭子及2个案例检材为样本,制作细胞悬液;配制0.05g/ml龙胆紫及2.5×10-4 g/ml亚甲基蓝染液。通过浓度梯度及时间梯度染色,分别建立并优化以龙胆紫、苏木素、亚甲基蓝为标识物的细胞悬液单染法;基于显微捕获仪平台,分别对等量染色的口腔上皮细胞进行分离检验,比较3种染色法及染色时间对显微捕获联合LVPCR技术检测结果的影响,优化细胞标识物;应用3者中较优的染色法对志愿者口腔上皮细胞悬液染色,捕获不同样本等量染色及未染色细胞分离检验,并对同一样本重复该操作20次,比较2种条件下检测结果成功分型率的差异,评价该染色法在显微捕获联合LVPCR技术中的适用性;应用于案例检材的细胞分离检验,初步研究所建细胞标识法的应用效果。结果:室温条件下,100μl细胞悬液加入0.5μl 0.05g/ml龙胆紫染液,染色5min,胞核呈紫红色,与胞浆对比明显,染色效果不随染色时间(≤60min)延长而明显变化。优化后的3种细胞悬液单染法均能对口腔上皮细胞胞核清晰标识,但龙胆紫染色细胞的分离检验的成功分型率及有效分型率均高于另外两种染色法,且染色时间(≤60min)对DNA检测结果无明显影响;而与未染色等量细胞分离检验结果比较,不同样本及同一样本多次重复试验结果的成功分型率无明显差异(p>0.05)。案例检材应用,目的细胞标识清楚,较未染色时易于辨识,捕获到更多目的细胞,多次分离检验结果叠加复合达同一认定标准。结论:龙胆紫细胞悬液单染法适用于显微捕获联合LVPCR技术,有助于提高该项技术中显微捕获仪平台的检测效能,并利于在法医实践检案中应用与推广。