目的：肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma，RCC)，又称肾癌，起源于肾小管上皮的高度血管化的恶性肿瘤，是泌尿系最常见的恶性肿瘤之一，约占成人恶性肿瘤的3%。近年来微小RNAs(microRNAs, miRNAs)被发现与细胞的增殖、分化、新陈代谢及凋亡密切相关，包括肿瘤的发生、发展。与蛋白质和mRNA相比，microRNA稳定性较强，易于检测不容易降解，是良好的生物标志物。研究表明miRNAs与多种恶性肿瘤的发生、发展相关，然而目前miR-33b-5p在肾细胞癌中的表达水平、功能研究及其作用的切确机制尚未有相关研究证实。因此本课题实验通过检测肾癌组织以及细胞系中的miR-33b-5p的表达水平，并通过体外细胞实验探究其功能，为进一步揭示miR-33b-5p在肾细胞癌中的发生、发展的分子机制奠定基础。
　　方法：在本课题组基因测序筛选的基础上，在肾细胞癌组织中筛选出低表达水平的miR-33b-5p，再通过逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)方法分别检测38组肾细胞癌及癌旁正常组织中miR-33b-5p的表达水平。在肾癌细胞系(786-O及ACHN)中转染miR-33b-5p功能类似物(mimic)或抑制剂(inhibitor)以过表达或敲低其表达，再通过体外细胞划痕实验、CCK-8实验、Transwell实验以及流式细胞术等实验分别验证miR-33b-5p对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭以及细胞凋亡的作用。
　　结果：通过逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)表明38组肾癌组织及癌旁正常组织中，其中大部分(27组,占72%)显示miR-33b-5p表达下调，统计显示癌旁正常组织中的miR-33b-5p平均表达量约为肾癌组织的3.15倍，表明肾细胞癌组织中miR-33b-5p表达量明显低于癌旁正常组织(p＜0.001)。与正常肾细胞系相比，786-O、ACHN和Caki-1细胞系中的miR-33b-5p表达量亦显著下调(p＜0.001)。与设立的阴性对照组相比，在786-O细胞系中转染miR-33b-5p功能类似物(mimic)或抑制剂(inhibitor)后，其表达水平分别是对照组的127.12倍和0.22倍(P＜0.05)。在ACHN细胞系中转染miR-33b-5p功能类似物(mimic)或抑制剂(inhibitor)后，其表达水平分别是对照组的163.14倍和0.31倍(P＜0.05)。与阴性对照相比，CCK-8实验结果提示促进miR-33b-5p表达可抑制肾癌细胞增殖，抑制miR-33b-5p表达则可促进细胞增殖；划痕实验结果提示促进miR-33b-5p表达可抑制肾癌细胞迁移，抑制miR-33b-5p表达则可促进肾癌细胞迁移；Transwell实验提示促进miR-33b-5p表达可抑制肾癌细胞迁移和侵袭，抑制miR-33b-5p表达则可促进细胞迁移和侵袭；流式细胞实验提示促进miR-33b-5p表达可促进肾癌细胞凋亡，抑制miR-33b-5p表达则可抑制肾癌细胞凋亡。
　　结论：与癌旁正常组和正常肾细胞系相比，miR-33b-5p在肾癌组织以及肾癌细胞系(786-O、ACHN、Caki-1)中均显著呈低表达水平。体外细胞实验结果表明通过上调细胞系中miR-33b-5p表达水平则可抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并诱导肾癌细胞凋亡，而下调细胞系中miR-33b-5p表达水平则促进肾癌细胞增殖、迁移和侵袭，并抑制细胞凋亡。综合上述实验结果表明，miR-33b-5p在肾癌组织中呈低表达水平，在肾癌发生、发展过程中可能发挥着抑癌因子的作用，参与调控肾癌细胞的生物学功能，这也许为进一步揭示miR-33b-5p在肾细胞癌的具体发病机制，同时也为将miRNAs运用于肾细胞癌的早期诊断、病情评估、预后预测及靶向治疗奠定理论基础。