1)边缘无浆体快速诊断试剂盒的研制;2)羊泰勒虫临床症状、血液学以及抗体变化的研究

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边缘无浆体病(Anaplasma Marginale Disease)是由边缘无浆体(A. marginle)经蜱传播而引起的一种传染性血液寄生虫病。本病主要引起牛、羊、鹿等家畜发病,严重的可以致死,牛死亡率可达80%。它是阻碍养牛业发展的几种主要蜱传播疾病中分布最广的一种。本病已被国际兽医局和我国农业部列为动物检疫的主要对象。 目前,国内外已经建立了许多检测边缘无浆体病的方法,如:补体结合试验(CF)、卡片凝集试验(CAT)、竞争ELISA(cELISA)、dot-ELISA、间接荧光抗体试验(IFAT)、核酸探针、PCR等。但上述方法操作繁琐、技术要求高、需要昂贵的仪器设备、花费高、耗时长等,不利于及时地对本病进行免疫监测和诊断,从而限制了它们在基层的推广使用。胶乳凝集试验(LAT)由于具有快速敏感、简单易行、特异性好等优点,已在许多疾病的诊断中广泛使用,但还未见用该方法检测边缘无浆体病的报道。 为了研究用LAT检测边缘无浆体病,作者将经液氮保存的边缘无浆体虫株复苏后人工接种试验牛,当该试验牛红细胞染虫率达到高峰时,采抗凝血,静脉接种另一头试验牛,当试验牛红细胞染虫率达到高峰时采抗凝血。然后用0.85%氯化铵破碎感染边缘无浆体的红细胞,离心,超声粉碎虫体,获得可用于胶乳凝集试验的无浆体可溶性抗原。将边缘无浆体可溶性抗原以化学交联的方式,致敏羧化胶乳,制成胶乳抗原。成功地建立了一种检测牛边缘无浆体病血清抗体的胶乳凝集试验(LAT)诊断方法。用此无浆体抗原致敏的胶乳,分别检测瑟氏泰勒虫病、双芽巴贝斯病、衣原体病、附红细胞体病的阳性血清,结果均为阴性;而与标准阳性血清、边缘无浆体免疫牛血清、该病流行区血清样品,均呈明显的凝集反应。结果表明,研制出的边缘无浆体病LAT方法,是一种特别适合基层现场检测边缘无浆体病血清抗体,具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉的优点。
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