东方百合‘贝尼尼’体细胞胚的诱导及蓝色基因遗传转化的研究

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百合花朵硕大、花姿优美、色彩鲜艳,可作为切花、盆花,亦可用于园林绿化,同时具有药用和食用功能。百合的观赏性状改良已涉及花期、花色、花姿和花香等方面,花色是百合最重要的观赏性状之一,近年来,随着蓝色康乃馨和蓝色玫瑰的上市,消费者对色彩高雅、梦幻的蓝色系百合也是追求不已,这也将是诸多育种工作者的主攻目标。本课题组已构建了东方百合‘索邦’花特异启动子调控的蓝色基因植物表达载体。本试验在此基础上,以东方百合‘贝尼尼’(Lilium oriental ’Bernini’)为试材,通过体细胞胚发生途径建立优良的遗传转化体系,利用农杆菌介导转化法将花特异启动子调控的蓝色基因导入百合体细胞胚和再生小鳞片。主要获得以下研究结果:(1)植物生长调节剂PIC单独使用、2,4-D与TDZ组合使用都能诱导东方百合‘贝尼尼’(Lilium oriental ’Bernini’)商品种球鳞片外植体形成体细胞胚,附加PIC的培养基上每个外植体可形成21.9个体细胞胚,2,4-D+TDZ诱导的外植体上最多可形成4.3个体细胞胚,PIC对东方百合体细胞胚的诱导效率明显高于2,4-D+TDZ。(2)诱导东方百合‘贝尼尼’(Lilium oriental ’Bernini’)商品种球体细胞胚发生的最佳培养基为MS+0.5mg·L-1Picloram+30g·L-1蔗糖+7g-L-1琼脂。(3)再生小鳞茎膨大的培养基为2MS+70g·L-1蔗糖+7g·L-1琼脂。(4)体细胞胚再生植株的培养基为MS+30g·L-1蔗糖+7g-L-1琼脂。(5)确定了转化受体材料体细胞胚的潮霉素筛选浓度为25mg·L-1。(6)获得了潮霉素抗性体细胞胚和再生小鳞茎
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