【摘 要】
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目的:探究Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes,CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法:超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes,流式细胞学检测exosomes对MDSCs的活化效应。分离
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目的:探究Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes,CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法:超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes,流式细胞学检测exosomes对MDSCs的活化效应。分离并培养小鼠树突状细胞(dendritic cells,DCs)和CD8+T细胞,制备DCs活化的肾癌抗原特异性CTLs。磁珠分选exosomes活化的MDSCs,羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)荧光染色和流式细胞学检测MDSCs对CTLs增殖的抑制作用。将MDSCs、CTLs和Renca细胞体外共培养,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测exosomes活化的MDSCs对CTLs杀伤效应的抑制作用。结果:Renca细胞来源的exosomes有效地诱导了MDSCs的聚集,成功制备了DCs并获得了DCs诱导的肾癌抗原特异性CTLs。与exosomes活化的MDSCs共培养后的CTLs其增殖指数和杀伤率明显低于与未活化的MDSCs共培养后的CTLs和单独的CTLs(P<0.05)。结论:Renca细胞来源的exosomes活化的MDSCs抑制了肾癌抗原特异性CTLs的体外增殖和杀伤效应,可能在肾癌免疫逃逸中扮演重要作用。
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