经血源性子宫内膜间充质干细胞向平滑肌细胞诱导分化的初步研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zq0453
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目的:从人体月经血中分离经血源性子宫内膜间充质干细胞(MenSCs),即子宫内膜再生细胞(ERCs),体外培养、传代并进行初步鉴定。初步探索MenSCs在体外向平滑肌细胞定向分化的诱导条件及可行性。  方法:采用Peroll密度梯度离心和贴壁培养的方法从女性月经血中分离MenSCs,并进行传代培养,观察细胞的形态及生长特性;采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标记物CD90和CD146在MenSCs中的表达。利用TGF-β1对第3代MenSCs进行刺激诱导,使其向平滑肌细胞定向分化,2周后镜下观察细胞形态,并用流式细胞术和免疫荧光技术检测诱导后细胞平滑肌肌动蛋白和肌球蛋白的表达,鉴定及评价诱导结果。  结果:从女性月经血中体外分离培养出了呈贴壁生长的梭形细胞群,增殖能力较快,3-5天即可传代一次。随传代次数增加,细胞仍可稳定生长且得到纯化。用流式细胞术检测间充质干细胞表型CD90和CD146呈阳性表达。对使用TGF-β1诱导后的细胞进行观察,细胞形态呈纺锤形,胞内可见纵向走形的丝状结构,并用流式细胞术和免疫荧光技术对诱导后的细胞进行检测,显示a-SMA和SM-MHC呈阳性表达。  结论:从人体月经血中分离得到一种具有高度增殖能力的子宫内膜间充质干细胞,可在体外稳定的传代培养。TGF-β1可诱导MenSCs向平滑肌细胞定向分化。
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