三氯乙烯致L-02肝细胞蛋白质组差异表达的研究

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  本课题运用蛋白质组学核心技术--双向电泳(2-DE)分析三氯乙烯染毒前、后L-02肝细胞蛋白质组表达改变,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF-MS)对差异蛋白斑点进行鉴定。初步探讨三氯乙烯中毒的关键蛋白和标志蛋白,为阐明TCE毒作用的分子机制提供新的线索,为找出TCE中毒的特异性生物效应指标,及早发现和防治TCE中毒奠定基础。同时分析低剂量TCE作用L-02肝细胞的效应,对低剂量TCE的兴奋性效应做进一步探讨,为全面深入的了解TCE与机体之间的相互作用,建立正确的TCE危险度评价体系提供参考。 方法:一、TCE作用L-02肝细胞剂量-反应关系的确定.   二、L-02肝细胞总蛋白双向电泳条件的建立. 三、TCE诱导L-02肝细胞毒的蛋白质差异表达研究.   四、TCE兴奋效应及其蛋白质组研究.  结论:一、成功确定TCE作用L-02肝细胞的剂量-反应关系及染毒时间,为进行下一步研究提供依据。二、探索及优化双向电泳条件,为成功进行双向电泳和质谱鉴定提供基础。三、TCE诱导L-02肝细胞毒并改变其蛋白质的表达,质谱分析成功鉴定出其中部分差异蛋白,为阐明TCE毒作用的分子机制提供新的线索。四、低剂量TCE存在兴奋效应,通过串联质谱鉴定差异蛋白发现大多数参与机体保护,为TCE的兴奋效应的深入研究提供基础资料,为建立正确的TCE危险度评价体系提供参考。
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