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目的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是一种以逐渐起病渐进加重记忆丧失为特征的神经变性病。AD的病理改变主要发生在大脑皮层及脑区,即①细胞外间隙由p-淀粉样蛋白(β-amyloid, Ap)沉淀构成的老年斑(Senile plaques, SPs);②细胞内由高度磷酸化tau蛋白构成的神经原纤维缠结(Neurofibrillarytangles, NFTs);③此外,AD还伴有神经突触的丢失,神经元的肿胀和死亡以及胆碱能神经元的功能障碍。2012中国卫生统计年鉴显示因痴呆的死亡率在逐年上升。目前AD多以对症治疗,缺乏有效的早期诊断方法和药物治疗。国内外研究显示,中药单体姜黄素通过抗炎、抗氧化、抑制异常蛋白聚积等药理作用对AD等神经变性病具有较好的神经保护作用,为AD的药物研究打开了一扇门。本研究旨在通过检测APP/PS1双转基因小鼠(AD小鼠)尿液中阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(Alzheimer-associated neuronal thread protein, AD7C-NTP)的含量变化,观察姜黄素对AD小鼠尿AD7C-NTP的动态影响,结合跳台实验行为学检测,观察姜黄素对9月龄AD小鼠学习记忆的影响,并通过免疫组化染色从形态学方面观察9月龄小鼠脑内胰岛素样生长因子1受体(Insulin-like growth factor1receptor, IGF1R).胆碱乙酰转移酶(Choline acetyltransferase, ChAT)和AD7C-NTP的表达和分布,应用Western-blot方法对上述指标进行半定量观察,进一步探讨姜黄素的神经保护作用的分子机制。材料和方-法1.采用3月龄小鼠APP/PS1双转基因小鼠为AD小鼠及同月龄同背景的正常对照小鼠C57BL/6J小鼠作为实验对象,每组6只。中药大、中、小剂量组给予姜黄素灌胃；罗格列酮组给予罗格列酮灌胃；模型组和正常对照组给予等体积的溶媒灌胃,每日一次,连续灌胃6个月。2.应用跳台实验测试AD小鼠学习记忆及记忆保持能力,评价姜黄素对9月龄AD小鼠认知能力的影响。3.运用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent, ELISA)检测AD小鼠尿AD7C-NTP的含量,观察姜黄素对不同月龄AD小鼠尿AD7C-NTP的动态影响。4.运用免疫组织化学染色和Western-blot方法观察AD小鼠予姜黄素干预6个月后海马AD7C-NTP. IGFIR及ChAT表达的变化,探讨姜黄素对神经保护作用的可能机制。结果1.姜黄素对AD小鼠尿AD7C-NTP的动态影响同一时间点小鼠尿AD7C-NTP浓度变化组间比较灌胃4、5、6个月后模型组与对照组相比小鼠尿AD7C-NTP浓度均较高(P<0.05)；其他各组小鼠尿AD7C-NTP均较模型组浓度低,且仅有治疗4个月的姜黄素大剂量组与模型组相比无统计学差异。不同时间点小鼠尿AD7C-NTP浓度的组内动态比较随鼠龄增长各组小鼠尿AD7C-NTP浓度均有所升高,但各治疗组均低于同时段的模型组。灌胃5个月和6个月与4个月,对照组与各治疗组组内比较均增加且有显著差异(P<0.01),各组灌胃6个月与5个月相比存在差异但均无统计学意义。2.姜黄素对AD小鼠学习记忆的影响9月龄干预后各组AD小鼠训练期错误次数和测试期错误次数：与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠错误次数明显增加(P<0.01),其他组AD小鼠无明显差异(P>0.05)；各组小鼠与模型组小鼠相比,错误次数明显减少(P<0.01)。各组小鼠潜伏期时间：与正常对照组小鼠相比,模型小鼠时间明显减少(P<0.01),其他组AD小鼠无明显差异(P>0.05)；与模型小鼠相比,其他各组小鼠潜伏时间均增加(P<0.05),姜黄素中剂量组小鼠无明显差异(P>0.05)。3.姜黄素对AD小鼠海马IGF1R、ChAT和AD7C-NTP表达的影响AD小鼠脑海马CA1区免疫组织化学染色结果：与正常组小鼠相比,模型组小鼠IGF1R阳性细胞数明显减少(P<0.01)；与模型组小鼠相比,罗格列酮组和姜黄素中剂量组IGF1R (?)日性细胞数明显增多(P<0.01)。与正常组小鼠相比,模型组小鼠ChAT阳性细胞数明显减少(P<0.01)；与模型组小鼠相比,姜黄素中剂量组阳性细胞数增多(P<0.05)姜黄素大剂量组阳性细胞数明显增多(P<0.01)。与正常组小鼠相比,模型组小鼠AD7C-NTP阳性细胞数明显增多(P<0.01)；与模型组小鼠相比,罗格列酮组和姜黄素大、中剂量组AD7C-NTP阳性细胞数明显减少(P<0.05)。AD小鼠海马Western-blot结果：IGF1R、ChAT和AD7C-NTP蛋白表达结果与免疫组化相符。结论姜黄素可以增加AD小鼠的学习记忆功能,减少AD小鼠海马和尿AD7C-NTP水平,增加AD小鼠海马ChAT和IGF1R蛋白的表达,延缓AD小鼠疾病进展。