多发性硬化症是一种慢性中枢神经系统自身免疫性疾病,其发病原因复杂,至今尚未阐明。由于其治疗病程长,往往复发和缓解交替出现,治疗比较困难。目前,已经验证的用于治疗多发性硬化症的方法疗效并不理想,由于其非选择性抑制免疫系统而造成严重的毒性,因此亟待开发用于治疗多发性硬化症的高选择性药物。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)是公认的研究人类多发性硬化的理想动物模型,具有与多发性硬化症相似的免疫及病理特征,为人们研究多发性硬化症的发病机制和治疗方法提供了一个良好的平台。T细胞的功能主要包括T细胞的活化、向各亚群的分化、以及从外周淋巴器官输出向病灶部位的浸润等。本研究通过选择性抑制T细胞相关功能治疗小鼠EAE,并对其可能的作用机制进行了深入探讨。在第一章中,我们首先筛选出选择性抑制T细胞IFNγ分泌而对T细胞的增殖无显著抑制作用的小分子化合物Fc11望其在治疗小鼠EAE的过程中避免传统免疫抑制剂由于对T细胞功能的非选择性抑制造成的免疫失衡。我们发现,口服Fc11著改善小鼠EAE,降低小鼠的发病率,抑制EAE小鼠脱髓鞘病变。对其机理的研究发现,Fc1并且不影响体内调节性T细胞的比例,但可选择性抑制IFNy/STAT1信号通路；促进SHP-2的酶活,但对IFNy/STAT1通路的抑制与SHP-2无关；促进IFNyR的内吞,并且剂量依赖性的抑制JAK2的激酶活性等。在第二章中,我们发现磷酸酶SHP-2抑制剂NSC 87877在2.5 mg/kg剂量下腹腔注射几乎可以完全阻止小鼠EAE的发生发展,这在以往文献报道中具有改善EAE症状的小分子化合物中是十分罕见的。对其治疗机理的进一步探讨,不仅有助于理解SHP-2是否在EAE的发生发展中担当重要作用,而且对多发性硬化症的治疗策略也会提供一些有益的参考。进一步的研究表明,SHP-2抑制剂NSC 87877体内外均不抑制T细胞抗原特异性的增殖、分化以及细胞因子的分泌；与此同时,T细胞中选择性敲除SHP-2的小鼠对EAE的敏感性与野生型小鼠基本一致,并且T细胞上选择性敲除SHP-2对T细胞的增殖活化、向T细胞亚群的分化以及细胞因子的分泌均无显著影响。以上结果提示,NSC 87877改善小鼠EAE并非通过抑制T细胞中SHP-2酶活来实现的。通过对一系列参与小鼠EAE模型的相关免疫细胞以及相关环节的逐步排查,发现NSC 87877系选择性地抑制MOG抗原特异性T细胞的迁移能力,从而有效地治疗小鼠EAE。“先锋”效应性T细胞向非炎性中枢神经系统的浸润是小鼠EAE以及多发性硬化症发生的重要环节,但目前相关的研究还很匮乏,针对此环节设计的治疗药物目前还是空白。我们的研究发现,来源于NSC 87877治疗组EAE小鼠的效应性T细胞对MOG再刺激引起的免疫应答与模型组相比并无明显差别,但其抑制了效应性T细胞向非炎性中枢神经系统的浸润,从而阻止了小鼠EAE的发生。通过分离NSC87877治疗组小鼠的效应性T细胞进行基因表达水平的检测,我们发现T细胞表面CCR7表达升高,可促进效应性T细胞归巢,其中CD8+T细胞CXCR7表达升高,可竞争性抑制具有相同配体SDF-la的CXCR4介导的趋化作用。结合NSC87877促进巨噬细胞分泌PGE2以及PGE2可促进活化T细胞CCR7表达的结果,我们推测,这种趋化因子受体的上调作用很可能由PGE2作为递质来实现。通过抑制与PGE2代谢相关的COX2酶活可一定程度上逆转NSC 87877对小鼠EAE的治疗作用,再次证明了PGE2是NSC 87877治疗EAE的关键分子之一。综上所述,本研究针对T细胞在免疫应答中的不同功能进行选择性抑制,提出了基于EAE模型的两个治疗策略。其一,提出了选择性抑制效应性T细胞IFNy分泌而不影响调节性T细胞功能的治疗EAE的策略,从而避免传统免疫制剂的非选择性抑制所造成的免疫失衡。通过有目的的筛选策略,筛选出选择性抑制T细胞IFNy分泌而不影响T细胞增殖的小分子化合物Fcll。Fcll可通过选择性抑制效应性Th1胞IFNγ的分泌来治疗小鼠EAE,避免了现有免疫抑制剂对免疫细胞不同亚群广泛抑制的副作用,其选择性地抑制机理是通过下调Jak2的酶活从而促进了IFNγR的内吞来实现的。其二,提出了选择性影响“先锋”效应性T细胞向非炎性中枢神经系统的浸润来治疗EAE的策略。发现SHP-2小分子抑制剂NSC 87877可通过促进COX2的酶活,上调PGE2的分泌,选择性影响效应性T细胞不同趋化因子受体的表达,抑制其向非炎性中枢神经系统的浸润,从而改善EAE。本研究结果可为临床上多发性硬化症的治疗、诊断及新药研发提供有益参考。