目的哺乳动物的大脑皮层是由不同的皮层特异性神经元组成的多层结构,这些神经元的产生有一个明确的时间顺序,例如,早期出生的神经元定位于皮层深层,而晚期出生的神经元多位于皮层表面,形成一个由内而外的皮层生成模式,但是目前它的分子机制仍然不甚清楚。在这里,我们报道一个I型跨膜蛋白Caspr,探索Caspr对大脑皮层神经元的产生时序的调控作用。方法1、利用免疫荧光染色技术检测Caspr在胚胎(E)12、14、16、18、P0(出生天)在皮层中的定位及表达情况。2、利用免疫荧光染色,比较分析不同胚胎发育阶段如E12、E14、E16、E18和P0时的Caspr+/+和同窝Caspr-/-深层和浅层神经元的数量。3、我们利用Caspr+/+及其同窝Caspr-/-,实施一系列的Brd U标记出生时间的实验来分析不同时间点深层和浅层神经元生成的比例。4、运用Brd U标记的方法,检测前体细胞增殖情况。5、我们利用逆转录PCR和转染的方法,进一步分析Caspr对皮层发育影响的分子机制。结果1、Caspr基因在E12至P0各个时期均有不同程度的表达。2、Caspr基因敲除导致深层和上层神经元产生延迟。3、在E14天,Caspr敲除导致放射状胶质细胞增殖增加。4、在E14天,Caspr敲除导致星型胶质前体细胞增加。5、Caspr通过Notch信号通路调节神经细胞产生的时间。结论Caspr严格控制大脑皮层神经元生成的时间顺序,从而保证在大脑皮层发育过程中不同类型的细胞在时间上产生的有序性。Caspr对皮层发育的这种调控作用有可能是通过调控Notch信号通路实现的。