【摘 要】
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黑木耳产业作为现代农业,其育种工作是重中之重,本论文通过首轮常温常压等离子体诱变育种技术,获得黑木耳Aa66,并作为出发株,再进而采用多功能等离子体诱变技术再进行诱变育种工作,得到315株诱变菌株;初筛有29株诱变菌株与出发株Aa66产生明显拮抗反应;再进行后续复筛试验,包括诱变菌株与出发株菌丝长速长势对比、三种胞外酶活(羧甲基纤维素酶酶活、漆酶酶活、半纤维素酶酶活)对比,以及生物学效率对比,确定
【基金项目】
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河北省现代农业产业技术体系黑木耳岗位创新团队项目HBCT2018050204;
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黑木耳产业作为现代农业,其育种工作是重中之重,本论文通过首轮常温常压等离子体诱变育种技术,获得黑木耳Aa66,并作为出发株,再进而采用多功能等离子体诱变技术再进行诱变育种工作,得到315株诱变菌株;初筛有29株诱变菌株与出发株Aa66产生明显拮抗反应;再进行后续复筛试验,包括诱变菌株与出发株菌丝长速长势对比、三种胞外酶活(羧甲基纤维素酶酶活、漆酶酶活、半纤维素酶酶活)对比,以及生物学效率对比,确定了诱变菌株Y9、Y16、Y37、Y50、Y180的性状均优于出发株Aa66,其中诱变菌株Y9性状最优,菌丝长速比出发株提高了11.65%,三种酶活分别提高21.62%、23.62%、9.75%,生物学效率为115.34%。对筛选得到的5株优良诱变菌株Y9、Y16、Y37、Y50、Y180和出发株进行真实性鉴定,结果表明5株诱变菌株与出发株之间的遗传变异系数为0.475~0.833之间,证明5株诱变菌株与出发株存在不同的遗传差异。在液体菌种-谷粒原种制备工艺中,通过研究不同谷粒对黑木耳营养生长的影响,对比接种液体菌种和PDA菌种,五种谷粒培养基上黑木耳菌丝长速长势,结果确定小麦作为培养基是最适谷粒,液体菌种长速最快,长速达5.62 mm/d;原种培养基最佳配方是麦粒88%,杂木屑10%,石灰2%,此配方下黑木耳菌丝体长速达6.13 mm/d。研究不同添加量对黑木耳营养生长的影响,确定15 m L液体菌种添加量是最优添加量,添加到“麦粒+10%杂木屑”培养基中,菌丝长速达6.53 mm/d。研究不同种龄对黑木耳营养生长的影响,结果表明96小时是最佳种龄,此时菌丝长速为6.64 mm/d。在黑木耳栽培的新型生物制剂应用中,通过对比不同稀释倍数的甲壳刺激素对黑木耳营养生长和生殖生长的影响,确定了甲壳刺激素的比例为1:1000倍,黑木耳菌丝生长最快,达5.36 mm/d,比对照组提高了8.28%;比例为1:1500时甲壳刺激素喷施黑木耳,黑木耳生物学效率最高,达126.58%,较对照组提高了11.39%。对比5株诱变菌株Y9、Y16、Y37、Y50、Y180和出发株以及市售黑木耳子实体多糖、膳食纤维、蛋白质、总黄酮的含量,结果表明,Y9、Y37这两株诱变菌株子实体四种成分均高于出发株和市售黑木耳,菌株Y50仅膳食纤维含量低于出发株,菌株Y16仅蛋白质含量低于出发株,菌株Y180仅总黄酮含量低于出发株,因此得出栽培培养基下5株诱变菌株Y9、Y16、Y37、Y50、Y180和出发株Aa66子实体相关成分优于市售黑木耳。菌株Y9子实体这4种成分含量均高于出发株Aa66和市售木耳,且含量最高,确定菌株Y9是最优菌株。
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