不同培养条件下胚胎Lewis Y寡糖的表达

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目的:观察不同培养条件下小鼠胚胎培养液中LeY寡糖抗原的分泌情况,探讨胚胎体外发育的促进因子。应用小鼠移植模型观察LeY寡糖及形态学评分与着床及妊娠间的关系,探讨评估胚胎质量的综合指标。方法:将小鼠2-细胞期胚胎在(单纯序贯培养、共培养-序贯培养及体内发育)三种不同条件下分别培养至八细胞胚、桑葚胚以及囊胚,将体外培养及体内发育的同期胚胎移入40ul培养微滴中继续培养4小时,移出胚胎后收集微滴。应用免疫印记法检测各微滴培养液中LeY寡糖的分泌情况,并将体内发育囊胚(3AA,3BB)移植到假孕第三日雌鼠子宫,11日后观察其受孕情况,比较LeY寡糖抗原与形态学评分对胚胎着床能力的预测效果。结果:1、共培养-序贯培养组中八细胞期之后胚胎的发育速度和囊胚形成率均高于单纯序贯培养组(P<0.05),但两组胚胎的形态学未见明显差异。2、胚胎不同发育时期LeY分泌情况比较:三个实验组八细胞期单胚胎培养微滴中均未检测到LeY寡糖的分泌,但在含10枚八细胞胚胎的培养微滴中均可检测出,并以共培养-序贯培养组胚胎分泌量为最高;桑葚胚及囊胚期单胚胎培养微滴中可检测到LeY,其中以单纯序贯培养组胚胎分泌量最低,而体内发育组及共培养-序贯培养组胚胎LeY分泌量间无显著性差异。3、形态学上同级别的体内发育囊胚,LeY高分泌组胚胎着床率高于低分泌组(P<0.01);LeY分泌状态相同的囊胚,形态学评分为3AA组胚胎着床率高于低评分3BB组(P<0.05);<WP=5>高分泌的3AA组囊胚着床率显著高于低分泌的3BB组(P<<0.01)。但高分泌组与3AA组胚胎的植入率间无显著性差异。结论:1、共培养-序贯培养组较单纯序贯培养组有更高的囊胚形成率,共培养-序贯培养对胚胎发育的促进作用在8-细胞期胚以后更明显。2、早期胚胎开始分泌少量LeY,囊胚期胚胎LeY分泌量明显增加,且分泌量的高低与着床率有关,可反映胚胎着床能力。3、子宫内膜可促进胚胎分泌型LeY的表达,但非必须条件。4、胚胎自分泌LeY对胚胎着床潜能有预测价值,特别是在对形态学评分相同胚胎的选择上更有意义。结合LeY检测和形态学评分来综合判断胚胎的着床能力将更有价值。
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