鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究

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目的:   由耐碳青霉烯类多重耐药鲍曼不动杆菌引起的严重院内感染近年呈现逐渐上升的趋势,使临床医生面临巨大的挑战,对其耐药机制的研究成为了一个重要的课题。本研究调查分析某综合性医院2007年1月到2009年12月间鲍曼不动杆菌在临床送检标本中的分离趋势及其对抗菌药物的耐药性,指导医生合理使用抗菌药物,以克服或减少细菌耐药性的出现或传播。同时,采用分子生物学方法研究鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药在医院的主要耐药机制。   方法:   1、从某综合性医院(三级甲等)实验室数据库中筛选出2007年1月到2009年12月3年临床标本所分离的鲍曼不动杆菌详细资料,应用WHONET5.4软件对其分离情况及药敏进行比对分析。   2、随机选取2008年1月~2009年9月期间分离的100株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(非重复菌株),应用VITEK-2compact全自动微生物鉴定药敏系统对其进行鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法(K-B法)进行药敏确认试验,结果判读采用相应年份的CLSI(美国临床实验室标准化协会)标准执行。   3、对100株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌利用VITEK-2Compact的高级专家系统软件(AESTM)进行耐药机制(产碳青霉烯酶)初筛。   4、设计合成针对blaIMP、blaVIM、blaSIM-1blaOXA-23和blaOXA-24的引物序列,采用PCR方法对100株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌进行特异性扩增,并对PCR产物进行DNA测序分析。   结果:   1、某综合性医院在2007~2009年3年间分离的鲍曼不动杆菌分别为238株、317株和403株,占同年病原菌分离率的4.820%、5.5%、7.2%,该细菌分离率呈现上升趋势;在14种常规测试的抗菌药物中,该菌对IMP的耐药率最低,分别为10.3%、24.5%、43.0%,其次是TZP(16.3%、28.6%、44.4%)和FEP(24.8%、37.4%、47.8%),对其余11种抗菌药物耐药率维持在一个较高的水平,耐药率在45.1%~75.7%之间。   2、随机筛选的100株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌主要分离自痰标本(80%),病区分布则主要集中在ICU(62%),其次是高干保健病区(13%);该类细菌对7类抗假单胞菌的抗生素耐药谱显示,多重耐药菌株占98%,泛耐药菌株占72%,对13种常规测试抗菌药物的耐药率都在85%以上。   3、VITEK-2Compact的高级专家软件系统(AESTM)显示为产碳青霉烯酶的100株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,经PCR特异性扩增,结果显示:用引物blaIMP、blaVIM、blaSIM-1、和blaOXA-24均未检测到阳性结果,提示在本次研究的鲍曼不动杆菌中,不产生IMP、VIM、SIM-1和OXA-24型碳青霉烯酶;有79株鲍曼不动杆菌用引物blaOXA-23扩增出阳性条带(目的片段长度为1058bp),并且分别选取2008年及2009年各1株细菌的PCR产物进行测序,与GenBank上已知序列比对,显示均为产OXA-23型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌。   结论:   1、某综合性医院2007~2009年3年间流行的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药情况严重,其中对亚胺培南的耐药率维持在较高水平,且呈逐年上升的趋势。   2、碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌对13种常规试验的抗菌药物耐药严重,耐药率均在85%以上,其中多重耐药菌株为98%,泛耐株达到72%。   3、该医院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌主要耐药机制之一是产OXA-23型碳青霉烯酶,未检测到IMP型、VIM型、SIM-1型金属酶和OXA-24型碳青霉烯酶。
其他文献
本研究拟研制Her-2/neu抗独特型单克隆抗体,为下一步深入研究Her-2/neu阳性乳腺癌抗独特型抗体疫苗奠定基础。在许多恶性肿瘤中都有Her-2/neu的大量增殖或高表达并且提示着较