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目的1.分别检测FOXO1、S1P1在胸腺瘤伴重症肌无力(myasthenia gravis,MG)、单纯胸腺瘤、胸腺增生以及正常胸腺标本中的表达,探讨它们在四种不同组织之间表达的临床意义和相关性。2.分别检测FOXO1、S1P1在胸腺瘤合并MG患者组织中的表达水平,分析其与性别、年龄、组织类型、Masaoka分期、Osserman分型、Ach R-Ab等临床病理因素的关系。3.分别分析FOXO1与S1P1对胸腺瘤合并MG患者外周T淋巴细胞的相关性。4.比较FOXO1与S1P1在胸腺瘤伴MG患者组织标本中表达的相关性及作用。方法1.运用免疫组化法(SP法)检测18例胸腺瘤合并MG、5例单纯胸腺瘤、2例胸腺增生伴MG和4例正常胸腺组织标本的表达。2.应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,分别检测FOXO1在胸腺瘤合并MG、单纯胸腺瘤、胸腺增生以及正常胸腺组织中m RNA的表达。3.采用直接免疫荧光染色,通过流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群CD4~+、CD8~+以及CD4~+/CD8~+的百分率。4.运用统计学软件SPSS11.5分析FOXO1和S1P1在各组研究对象的表达情况及与各相关因素的相关水平。结果1.FOXO1在胸腺瘤合并MG患者组织中表达阳性,表达率为88.9%(16/18),强阳性表达66.7%(12/18);在单纯胸腺瘤组织中表达率为40.0%(2/5),强阳性表达20%(1/5);在胸腺增生组织中表达率为100%(2/2);在正常胸腺组织中表达率为25%(1/4)。FOXO1在胸腺瘤合并MG组织中表达明显高于单纯胸腺瘤(P<0.05)和正常胸腺组织(P<0.05),而与胸腺增生伴MG组织中的表达无明显差异(P>0.05)。在胸腺增生组织中FOXO1主要表达于胸腺组织皮质和髓质区的细胞核及胞浆中,其中细胞核表达较多;在胸腺瘤合并MG组织中FOXO1主要表达于髓质岛及周围,细胞胞浆中表达较多;正常胸腺组织及单纯胸腺瘤中散在表达。2.S1P1在胸腺瘤合并MG患者组织中表达阳性,表达率为83.3%(15/18),强阳性表达72.2%(13/18);在单纯胸腺瘤组织中表达率为40.0%(2/5),强阳性表达40%(2/5);在胸腺增生组织中表达率为100%(2/2),强阳性表达率为50%(1/2);正常胸腺中则低表达。S1P1在这四组组织标本中表达组间分析存在差异(P<0.05);胸腺瘤合并MG患者阳性表达与胸腺增生患者之间无明显差异(P>0.05),与单纯胸腺瘤和正常胸腺组织表达有显著差异(P<0.05)。S1P1主要表达于胞浆和胞膜上。胸腺增生组织标本中S1P1主要分布在胸腺组织的髓质区;胸腺瘤组织标本中主要分布于髓质岛及血管周围间隙;正常胸腺组织散在表达。3.胸腺瘤合并MG、单纯胸腺瘤、胸腺增生、正常胸腺组织中FOXO1的m RNA相对表达量分别为4.32±0.86、5.99±1.50、4.38±0.25、6.69±0.03,四种组织中表达量存在显著差异(P=0.001)。胸腺瘤合并MG组织中FOXO1的m RNA相对表达量明显高于单纯胸腺瘤(P<0.05)。4.FOXO1与S1P1在胸腺瘤合并MG组织中表达呈平行水平,相关分析表明两者存在相关关系(γ=0.481,P=0.043<0.05);FOXO1与S1P1的表达与外周血CD4~+、CD4~+/CD8~+T淋巴细胞均存在高度正相关性(P<0.01),与CD8无明显关系(P>0.05);FOXO1与S1P1的表达与性别、年龄、Masaoka分期、Osserman分型、组织类型、Ach R-Ab等临床因素之间未见明显相关性。结论1.胸腺瘤合并MG和胸腺增生患者中FOXO1与S1P1表达水平增高,说明其与MG发病机制有关;但在胸腺瘤中FOXO1与S1P1蛋白表达的空间位置不同于胸腺增生,表明其在这两种疾病中的致病原因有所差异。2.胸腺瘤中FOXO1与S1P1表达增高,表明其与肿瘤的发生可能有关,具体关系尚需进一步探索。3.在胸腺瘤合并MG患者中,随着FOXO1与S1P1的高表达,CD4~+T细胞所占比重及CD4~+/CD8~+T细胞比值也升高,表明其参与胸腺上皮细胞对T淋巴细胞的输出过程。4.从外周血检测结果看,CD4~+T细胞的高表达或CD8~+T细胞的低表达致CD4~+/CD8~+T细胞平衡被破坏,这也许诱发了MG的发生,但仍需进一步研究。