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目的:通过建立溴氰菊酯(Deltamethrin,DM)染毒动物模型,观察DM急、慢性中毒对实验动物肝、肾等组织的形态学影响,探讨DM急、慢性中毒的可能机制,积累病理学方面的资料,为临床DM中毒的诊治提供科学合理的理论依据。
方法:1.慢性染毒实验:将32只大鼠随机分为4组,橄榄油对照组、DM1.56mg/kg组、DM3.125mg/kg组、DM6.25mg/kg组,每组8只,染毒组经口灌胃以橄榄油溶解的不同剂量的DM,灌胃染毒6个月,制成DM慢性中毒动物模型。于染毒结束前称量动物体重,取肝、肾组织称重,经过固定后制成石蜡切片,应用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色和过碘酸-schiff反应(Periodicacid-schiff,PAS)染色,观察大鼠DM慢性中毒后,肝、肾组织的形态学及糖原含量的变化。2.急性染毒实验:将18只小鼠随机分为3组,橄榄油对照组、DM3.125mg/kg组、DM6.25mg/kg组,每组6只,腹腔注射DM溶液3-5天,制成DM急性中毒动物模型。每组分别于第3天和第5天处死动物各一半,取肝、肾、小脑组织称重并固定后并制成石蜡及冰冻切片,经HE染色和PAS染色,观察小鼠DM急性染毒肝、肾组织的形态学和糖原含量的变化;应用酶组织化学法,检测琥珀酸脱氢酶(SuccinateDehydrogenase,SDH)、单胺氧化酶(Monoamineoxidase,MAO)和碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase,ALP)在肝、肾组织中的酶活性情况;应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色方法,检测γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyricacid,GABA)在小脑浦肯野细胞中的表达。
结果:1.慢性染毒实验:各DM染毒组大鼠的肝、肾脏器系数与对照组肝、肾脏器系数比较均有不同程度降低(P<0.05);HE染色切片显示DM染毒组肝细胞肿张,大量脂肪细胞弥漫性分布,肾小管水肿,肾小球毛细血管扩张淤血;PAS染色切片显示各DM染毒组肝、肾细胞胞浆内糖原含量不等,随DM染毒剂量的增加,糖原含量与对照组相比明显减少差异具有统计学意义(P<0.05)。2.急性染毒实验:HE染色观察可见DM染毒组小鼠肝脏肝索排列紊乱,肝血窦及中央静脉内淤血严重,可见成团炎细胞聚集内肝细胞结构消失,可见肝细胞和肾小管水肿,肾小球毛细血管扩张淤血,此现象以DM6.25mg/kg组明显;PAS染色切片显示,各DM染毒组肝、肾细胞的糖原含量不等,随DM剂量的增加,糖原颗粒含量与对照组比较明显减少差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01);酶组化染色切片显示,各DM染毒组肝肾内SDH和MAO酶活性较相应对照组增强,酶颗粒增多(P<0.05),ALP酶活性在肾脏表达较对照组增强,酶颗粒增多,但在肝表达较对照组减弱,酶颗粒减少(P<0.05);免疫组化GABA染色显示各DM染毒组小脑浦肯野细胞内GABA的表达与对照组相比降低,差别有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.小剂量DM可导致实验动物的肝、肾组织结构形态学的改变,在同一剂量下,由于动物品系不同,对大鼠和小鼠的损害程度不同,且具有明显的剂量-效应关系和时间-效应关系。2.SDH和MAO分布于线粒体,而ALP是一种膜酶,与机体的能量代谢密切相关,DM染毒动物的酶活性染色观察结果显示,DM可以增加肝肾线粒体内SDH、MAO的酶活性及降低肝的ALP酶活性,提示DM通过对各种酶活性表达的增加或降低的影响,作用于肝肾细胞影响肝肾的代谢功能而导致肝、肾的损伤。3.DM可影响GABA在小脑浦肯野细胞的表达,导致GABA表达降低,提示DM可能通过此途径影响小脑的精细调节功能及影响中枢神经系统的兴奋状态。