鸭瘟病毒（Duck plague virus,DPV）属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科、马立克氏病毒属,是目前危害我国养鸭业的重要病原之一。本研究主要探讨鸭瘟病毒UL25基因密码子去优化后对UL25蛋白表达以及病毒复制的影响,并对UL25CD突变株作为候选疫苗株的潜力展开研究获得了以下结果:1.鸭瘟病毒UL25基因的重编码对病毒体外复制的影响分析鸭瘟病毒UL25基因以及宿主鸭的密码子偏好性,选择宿主使用频率最低的密码子替换UL25基因中的同义密码子,在不改变氨基酸顺序的情况下通过不同程度的密码子去优化对UL25基因进行重编码。将构建的9个UL25基因重编码真核表达质粒转染至DEF细胞中,通过Westernblot、IFA等检测UL25蛋白的表达水平变化;灰度分析发现随着去优化程度的增加,UL25蛋白的表达量逐渐下降。利用荧光定量PCR检测UL25基因的转录水平是否受重编码的影响,结果发现不同去优化程度的UL25基因在转录水平上并无显著差异,证明其表达量的差异与转录水平无关。随后根据上述结果选择表CD、CD1、CD4、CD7四个去优化程度递进的去优化设计方案构建重组病毒。经Westernblot检测感染病毒的细胞中UL25蛋白的表达情况,得到与真核表达相似的结果。通过生长动力学实验探究UL25基因密码子去优化后对病毒复制的影响,发现病毒仅在感染前期复制能力弱于野生型病毒,并且病毒复制能力与密码子去优化程度呈反比,在病毒感染中、后期病毒滴度趋于一致。2.UL25基因去优化重组病毒作为疫苗潜力评估研究发现,UL25基因全长密码子去优化时减毒效果最佳,因此本文继续探究重组病毒r-UL25CD在宿主体内的安全性以及是否具有成为鸭瘟疫苗候选株的潜力。在安全性评价试验中选择10~4TCID50、10~5TCID50、10~6TCID503种不同剂量对14日龄雏鸭进行攻毒,并以体温、体重、存活率、器官病变为监测指标。结果发现不同剂量组在攻毒后都表现为短暂发热以及体重的增长速度降低,接着很快便恢复到正常的范围以及增长速度。另外与回复株和野毒株相比,3个剂量的实验组雏鸭均未发生死亡。观察器官的病变情况发现,与回复株和野毒株相比,除了脾脏和胸腺外其余器官无明显眼观病变。进一步探究该毒株的免疫保护能力,发现与疫苗组和阴性对照组相比,r-UL25CD免疫组的鸭子在接受100LD50的致死性攻毒后,体温、体重、存活率、器官病变均无任何不良表现。此外,中和抗体监测以及特异性抗体水平检测结果表明,r-UL25CD免疫后的鸭子可产生比疫苗组更高的DPV特异抗体以及中和抗体水平,在免疫保护试验中表现处了出色保护能力,根据上述结果说明该重组病毒具有作为减毒疫苗候选株的潜力。