论文部分内容阅读
目的： 通过自制超声微泡同时包载紫杉醇和miR-34a，并检测微泡的一般性质，通过体内外实验，评价超声介导载紫杉醇及miR-34a微泡作用于宫颈癌的协同抑制效果。 方法： （1）采用改良双乳剂挥发法和低温真空干燥技术，自制载紫杉醇及miR-34a微泡，通过扫描电镜观察微泡形态，粒径分布仪检测微泡粒径大小和分布，紫外分光光度计分析药物浓度计算载药量和包封率。 （2）超声介导载紫杉醇及miR-34a微泡作用于U14宫颈癌细胞，Western Blotting检测U14细胞中Bcl-2和CDK6蛋白的表达情况。 （3）建立U14宫颈癌皮下移植瘤模型，并进行随机分组，分为：空白对照组、空微泡+超声组、miR-34a微泡+超声组、紫杉醇微泡+超声组、紫杉醇联合miR-34a微泡+超声组。每三天进行一次相应的处理，根据肿瘤体积绘制肿瘤生长曲线，在实验结束时处死小鼠，计算各组体积和质量抑瘤率，肿瘤组织行病理组织学检查，免疫组织化学法检测各组肿瘤组织微血管密度（MVD）的表达情况，Western blotting检测各组肿瘤组织Bax、Bcl-2和CDK6蛋白的表达水平。 结果： （1）载紫杉醇及miR-34a微泡电镜下呈圆形，表面光滑，粒径分布仪检测平均粒径为1.76μm，紫外分光光度计分析药物浓度，紫杉醇的载药量为11.86％，包封率为89.68%，miR-34a的包封率为33.11%。 （2）超声介导载紫杉醇及miR-34a微泡作用于U14宫颈癌细胞，与对照组相比，U14细胞中Bcl-2和CDK6蛋白表达均下调。 （3）超声介导载紫杉醇及miR-34a微泡作用于U14宫颈癌皮下移植瘤，与对照组相比，紫杉醇联合miR-34a微泡组生存状态最好，肿瘤生长明显减慢，肿瘤体积和质量明显下降（P<0.01），其体积和质量抑瘤率分别为78.57%、87.97%，明显高于其它各组（P<0.01）；HE染色观察，用药的四组肿瘤组织呈现不同程度变性坏死，紫杉醇联合miR-34a微泡组表现最为明显，癌细胞数目减少，并可见大量核固缩和核碎屑以及大片无组织红染区；免疫组织化学法显示用药的四组肿瘤组织MVD表达不同程度减少，以紫杉醇联合miR-34a微泡组减少最为明显（P<0.01）；Western blotting结果显示，与对照组相比，用药的四组肿瘤组织Bax的表达上调，Bcl-2和CDK6的表达下调，以紫杉醇联合miR-34a微泡组表现最为明显（P<0.01）。 结论： 超声介导载紫杉醇及miR-34a微泡可以抑制宫颈癌细胞的生长，诱导凋亡，阻断靶基因的表达，在体内外实验中均表现出良好的协同抑制作用。为超声介导宫颈癌的化疗联合基因治疗提供了理论依据，也为宫颈癌的临床治疗提供了新思路。