金黄色葡萄球菌拉曼光谱分析技术研究

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金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,它不仅给人类的健康带来了种种威胁,还造成了巨大的经济损失。金黄色葡萄球菌普遍存在于自然界中,能够引起很高的发病率和病死率,是全球公共卫生与医疗健康领域中的重要问题。因此,建立一种快速地检测金黄色葡萄球菌的方法具有重大意义。共聚焦显微拉曼光谱仪集高分辨率、高灵敏度、所需样品浓度低、信息量大等优点于一体,在多个研究领域发挥着越来越重要的作用。本研究利用共聚焦显微拉曼光谱仪对金黄色葡萄球菌进行检测,并用Matlab分析所获得的拉曼光谱,建立了一种快速检测金黄色葡萄球菌的方法,为金黄色葡萄球菌快速检测方法在食品安全检测和临床检验等方面的应用奠定了基础。  本研究首先利用PCR验证所用菌株正确性后,利用共聚焦显微拉曼光谱仪对五种常见的食源性致病菌:金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、大肠杆菌、产气肠杆菌和沙门氏菌在种属水平上进行区分,用距离判别分析和贝叶斯判别分析法验证分类结果的准确性,结果显示它们的平均分类准确率分别为89%和91.67%。然后研究了不同培养时间、不同形态的培养基和不同种类的培养基对10株金黄色葡萄球菌的地方分离菌株的拉曼光谱的影响,结果显示,培养条件对拉曼光谱的影响比金葡菌本身的遗传特性对拉曼光谱的影响要大。我们又将本研究中的不同浓度的五种致病菌接种在含有25 g牛奶的225 mL的7.5% NaCl肉汤中,对其检测限进行了测定,以验证拉曼光谱鉴别金黄色葡萄球菌的能力,结果显示,拉曼检测13株金黄色葡萄球菌的检测限为:100 cfu/mL。沙门氏菌可在高盐的肉汤培养中检出,单增李斯特菌、大肠杆菌和产气肠杆菌均未检出。结果表明,拉曼可以很好的将金黄色葡萄球菌和其他菌株区别,并能很好的检测。本研究所建立的拉曼快速鉴别金黄色葡萄球菌的方法为食源性金黄色葡萄球菌的污染快速检测方法的应用起到了重要的推动作用。
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