目的:观察法舒地尔对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:1.用0.1%I型胶原酶消化分离人脐静脉内皮细胞,加入ECM完全培养基中培养,用胰蛋白酶进行消化传代培养,用倒置显微镜对培养的细胞进行形态观察和免疫组化鉴定。2.人脐静脉内皮细胞HUVECs随机分为3组:对照组(加入内皮细胞培养基)、LPS组(加入0.1ug/ml LPS)、法舒地尔组(3.275 ug/ml的法舒地尔+0.1ug/ml LPS)。3.Western-blot检测Rho A、ROCK2、p-ERM蛋白表达情况,荧光定量PCR检测Rho A、ROCK2、p-Ezr m RNA表达。4.激光共聚显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的分布变化。结果:1.原代培养的内皮细胞在接种后24h后完全贴壁生长,第3天融合呈铺路石样镶嵌排列,免疫组化见内皮细胞中胞浆中第VIII因子相关抗原呈阳性反应,证实为内皮细胞。2.与对照组相比,LPS组RhoA、ROCK2和p-ERM蛋白及基因水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,Fasudil组中ROCK2和p-ERM显著降低(P<0.01),Rho A没有明显差异(P>0.05)。LPS诱导了细胞骨架肌动蛋白F-act-in的分布变化,法舒地尔能够抑制这种改变。结论:1.本实验成功分离和培养原代HUVECs。2.Rho/ROCK/ERM通路在脂多糖诱导HUVECs细胞骨架改变中起重要作用。3.法舒地尔可拮抗LPS诱导的骨架蛋白重排等HUVECs损伤,可能与通过抑制Rho/ROCK信号通路的活化有关。