树突细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养对多药耐药肿瘤细胞系的杀伤活性研究

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目的 树突状细胞(Dendritic cell,DC)是已知体内功能最强的抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APCs),不仅可以激发特异性免疫应答,引起相应的特异性杀伤效应,而且,还可以促进非特异性的细胞毒杀伤。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIKs)是在多种细胞因子(IL-2、IL-1、IFN-γ、抗CD3单克隆抗体等)作用下,由外周血、骨髓或脐血中分离出的单个核细胞,培养而获得的一种具有细胞毒作用的免疫活性细胞,其抗肿瘤细胞的主要机制是非MHC(主要组织相容性复合体)限制性杀伤。有资料表明DC和CIK细胞共培养之后,可以促进DC的成熟,分泌大量IL-12,同时CIK细胞也可以获得大量增殖、分泌大量IFN-γ、明显增强对靶细胞的杀伤效应。有趣的是,DC对T细胞刺激时,也可以分泌大量IL-12,激活的T细胞也会分泌大量的IFN-γ;在CIK细胞中,CD3~+CD56~+细胞作为发挥非特异杀伤的主要细胞,仅占CIK细胞总数的35.5%,而CD3~+CD56~-细胞占总数的58%,其中大部分被证明是CD8~+细胞;同时在CIK细胞培养初期,可以检测到CD45RA表型,该表型是幼稚T细胞(naive T cell)表面标志,随着CIK细胞成熟,该表型明显下降。上述资料均表明,在CIK细胞中有可能存在一定数量的T细胞,那么这部分T细胞能否对表达特异性抗原的肿瘤细胞产生特异性杀伤呢?为进一步验证上述想法,本实验特采用表达P-gp特异性抗原的乳腺癌细胞MCF-7/ADR进行冻融抗原,进
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