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目的：识别NRXN3a基因新的启动子,确定最小启动子区域,寻找对NRXN3a基因转录起关键作用的顺式作用元件。方法：通过设计PCR引物并引入酶切位点,以HEK293 DNA为模板,用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增,用分子克隆的常规方法将扩增出的DNA片段插入到PGL4.10载体中以构建含有不同区域的NRXN3α基因启动子-荧光素酶报告基因载体。用常规的方法培养U87MG细胞,利用转染试剂Lipofectamine2000将NRXN3α基因的荧光素酶报告基因载体与内参照海肾荧光素酶报告基因载体共同转染到U87MG细胞内,继续培养细胞24小时,收细胞。用双荧光素酶检测试剂(Promega)测定细胞的荧光素酶活性并用内参照进行校准,用萤火虫荧光素酶活性(Fluc)/海肾荧光素酶活性(Rluc)的比值反映NRXN3α基因启动子-荧光素酶报告基因载体的活性,比较不同报告基因载体间活性的差异,确定NRXN3α基因的最小启动子功能区域。然后以P4NRXN3α-443/-162E为模板,构建含不同突变体的NRXN3α基因荧光素酶报告基因载体,通过比较不同突变体与不含突变体的载体的荧光素酶活性,找到对荧光素酶活性影响最大的突变体,确定NRXN3α基因顺式作用元件的序列。结果：确定了第一个外显子到ATG的序列真实存在并发生了转录。成功构建了含有不同区域的NRXN3a基因启动子-荧光素酶报告基因载体,插入片段最长为2359bp,包含第一个外显子上游2308到下游51的序列,即P4NRXN3a-2308/+51E。3’端删切发现+99/+109之间存在抑制基因转录的功能区域。5’端删切发现-322-162可能是NRXN3a基因的最小启动子区域,通过基因的定点突变发现两个顺式作用元件序列-318/-311和-300-295。结论：通过实验找到了新的NRXN3a基因具有启动子活性的基因组序列。成功找到了NRXN3a基因的最小启动子区域,并且发现了控制NRXN3a基因转录的关键元件序列-318/-311和-300/-295。