【摘 要】
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目的:（1）对何首乌（Radix Polygoni Multiflori,RPM）水提物中的化学成分进行鉴定,对何首乌水提物中可能的毒性物质进行定量,并对吸收入血成分进行鉴定从而为何首乌的毒性物质基础提供依据。（2）采用小鼠动物模型考察何首乌水提物致药物性肝损伤作用,利用转录组学方法筛选差异表达基因以及可能的调控机制,为何首乌水提物致药物性肝损伤机制提供理论依据。方法:（1）通过UPLC-Q-Or
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目的:（1）对何首乌（Radix Polygoni Multiflori,RPM）水提物中的化学成分进行鉴定,对何首乌水提物中可能的毒性物质进行定量,并对吸收入血成分进行鉴定从而为何首乌的毒性物质基础提供依据。（2）采用小鼠动物模型考察何首乌水提物致药物性肝损伤作用,利用转录组学方法筛选差异表达基因以及可能的调控机制,为何首乌水提物致药物性肝损伤机制提供理论依据。方法:（1）通过UPLC-Q-Orbitrap MS法鉴定何首乌水提物的化学成分与灌胃吸收入血成分;建立高效液相色谱方法,测定何首乌水提物中二苯乙烯苷与4种蒽醌类化合物的含量;（2）32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组,分别为14天与28天给予0.5%CMC-Na的空白对照组,14天与28天给药剂量为3.75 g/kg何首乌组。灌胃给药,每日称量体重,最后一次给药24h后收集小鼠血浆及肝脏组织样本。考察肝脏系数、肝组织病理学变化、肝功能相关生化指标的变化;应用Illumina高通量测序平台获取原始数据,并对数据进行质控,筛选差异表达基因,并对差异基因进行GO、KEGG pathway富集分析,从而得到差异表达基因的调控途径与信号通路。结果:（1）何首乌水提物中共鉴定出小分子糖类、二苯乙烯类、蒽醌类以及其他类等共17个化合物,建立高效液相色谱法测得何首乌水提物中二苯乙烯苷的含量为1.023%,大黄素的含量为0.077%,大黄素甲醚的含量为0.024%;灌胃给予何首乌水提物后共鉴定出13个入血成分,除反式二苯乙烯苷外,其余均为代谢产物。（2）动物体重变化、肝脏系数与生化指标结果表明何首乌水提物连续给药14天无明显差异,连续给药28天会导致体重轻微降低;肝脏系数表明连续给药14天与28天均会导致肝脏系数增加;病理切片结果表明小鼠连续灌胃给药14天与28天后会导致肝脏出现不同程度的损伤,相较于连续给药14天,28天给药组肝细胞水肿现象明显。转录组学的结果显示何首乌水提物给药28天会影响基因的表达调控与体内生物学过程。GO与KEGG pathway分析结果表明影响何首乌致肝损伤可能的机制主要是由免疫、炎症或脂质调控介导的。结论:何首乌水提物中共鉴定出17个已知化合物,含量测定结果符合中国药典标准;小鼠灌胃给药后共鉴定出13个入血成分,入血成分主要是二苯乙烯苷与蒽醌类物质的代谢产物;小鼠连续灌胃给药14天与28天的何首乌水提物会造成肝细胞损伤。其损伤机制可能与免疫、炎症或脂质调控相关。本研究为何首乌的毒性物质基础与何首乌致药物性肝损伤机制研究提供了一定的理论依据。
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