山药的染色体制片技术优化与核型分析

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本实验以通过大田植株、组培苗、室内培养块茎(或零余子)获取的山药根尖为实验材料,进行了适用于山药核型分析的染色体制片技术的优化,筛选出最优的取材、预处理、解离的方法,并对河南铁棍这一知名山药品种进行核型报道,为山药的种质创新及利用、亲缘关系、育种工程等方面的研究开发打下细胞学基础。主要的研究结果如下:1、通过室内基质培养山药块茎或零余子获取根尖的方式为最理想,操作简便,根尖中含有的中期分裂相多,获得染色体分散良好的分裂相的几率也大。其次为通过组培苗获取根尖的方式较好。2、适合核型分析的预处理试剂为8-羟基喹啉、8-羟基喹啉与秋水仙素的混合液。最好的预处理方法为2mmol/L的8-羟基喹啉在4℃下处理2h。3、酸解加酶解的方式比单用酸解方式解离效果好,获得的分裂相的染色体都在同一水平面上,染色体清晰,更适合于核型分析。4、统计了两份薯蓣(Dioscorea opposite Thunb.)和两份参薯(D. alata L.)的染色体数目。两份参薯DS31和HN42的染色体数均为2n=40。两份薯蓣HNTGH39和LYZ60的染色体数均为2n=120,进一步证实薯蓣具有不止1个的染色体数目,本实验在薯蓣种质中发现了2n=120的染色体数目。5、对河南铁棍山药进行了核型分析,核型公式为2n=96m(6SAT)+l8sm(4SAT)+4st+2T,其中有5对染色体有随体。染色体的绝对长度范围0.688~2.628μm,属于微小型染色体或小型染色体。相对长度范围为0.869%-3.319%。核型不对称系数为58.13%。最长染色体长度是最短染色体长度的3.819倍,臂比大于2:1的比例为11.67%,核型不对称性属于2B型,说明河南铁棍山药在系统演化上处于比较原始的植物。
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