第一部分Talin2基因敲低通过改变肿瘤微环境调节人乳腺癌细胞MDA-MB-231的转移目的:对乳腺癌患者术后组织样本进行免疫组化检测,了解Talin2蛋白在乳腺癌组织与癌旁组织的分布情况。研究Talin2基因敲低对MDA-MB-231细胞的迁移、侵袭情况和对肿瘤微环境中AKT信号转导及对细胞中葡萄糖与乳酸脱氢酶含量的影响,探讨Talin2基因敲低治疗乳腺癌的可行性。方法:获取未经治疗的乳腺癌患者的术后组织样本,经病理学确认证实后用组织微列阵技术进行免疫组化（IHC）检查。用shRNA基因敲低人乳腺癌细胞MDA-MB-23 1 中 Talin2,然后用逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质印迹分析（Western blot analysis）确认 Talin2 的敲低效果。对敲低 Talin2 的 MDA-MB-23 1 细胞用 transwell入侵法观察细胞侵袭能力,划痕实验观察细胞的迁移能力。用试剂盒测定细胞中的葡萄糖与乳酸脱氢酶的含量,蛋白质印迹分析检测AKT,pAKT,mTOR,pmTOR,HIF-1α,总S6K,pS6K的表达水平。结果:乳腺癌组织比邻近正常组织样本中Talin2的表达高5.6倍。Talin2基因敲低成功的2组MDA-MB-231细胞系中内源性Talin2蛋白质水平显著低于对照组,Talin2 mRNA的表达水平明显降低。2组Talin2基因敲低的MDA-MB-231细胞的侵袭能力降低,48小时后迁移能力明显降低。细胞中的葡萄糖与乳酸脱氢酶的含量降低,蛋白质印迹分析检测细胞中AKT,pAKT,mTOR,pmTOR,HIF-1α,总S6K,pS6K的含量均降低。结论:与正常组织相比,乳腺癌组织中Talin2的表达更高。Talin2基因敲低可能通过下调AKT/mTOR信号传导降低基础葡萄糖和LDH水平,从而影响肿瘤微环境,导致MDA-MB-231细胞的侵袭、迁移能力明显减低。Talin2基因敲低可能是乳腺癌治疗的一个新途径。第二部分18F-FDG代谢变化评价Talin2基因敲低对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长抑制作用的研究目的:观察Talin2基因敲低前后人乳腺癌细胞生长抑制作用及18F-FDG摄取变化情况,探讨通过18F-FDG代谢变化观察Talin2基因敲低治疗效果的可行性。方法:将Talin2基因敲低的人乳腺癌细胞MDA-MB-231培养、传代,在无糖培养基中培养后再加入18F-FDG,在37℃下孵育30min、60min、90min、120min,清洗离心后用γ测量仪测量细胞的CPM计数（B）及上清液CPM计数（F）,计算18F-FDG的细胞结合率。将处于对数生长期的Talin2基因敲低的人乳腺癌细胞MDA-MB-231接种于6周龄的重度联合免疫缺陷Scid小鼠的皮下部位,肿瘤生长4周并测定肿瘤大小。人乳腺癌细胞MDA-MB-231与Talin2 shRNA2基因敲低的人乳腺癌细胞荷瘤鼠尾静脉注射18F-FDG,分3个时段颈椎脱位处死小鼠,测量不同组织器官每克组织的摄取百分数（%ID/g）,并进行统计学处理。随机选择两种荷瘤鼠各3只,取出其肿瘤组织,用Western Blot测量Talin2蛋白质表达水平。同时将人乳腺癌细胞MDA-MB-231与Talin2shRNA2基因敲低的人乳腺癌细胞传代培养28天,用Western Blot测量Talin2蛋白质表达水平。结果:Talin2基因敲低的人乳腺癌细胞MDA-MB-231 18F-FDG的细胞结合率随时间延长逐渐增加。在90min、120min时,与对照组对比,Talin2基因敲低组18F-FDG的细胞结合率降低（P＜0.05）。荷瘤鼠体内分布实验发现:在60min、90min、120min不同时段,Talin2 shRNA2基因敲低组小鼠的肿瘤组织摄取18F-FDG低于对照组（P＜0.05）。肿瘤模型生长抑制实验表明:Talin2基因敲低组小鼠肿瘤生长慢、体积小。2周内,与对照组对比,随着时间的延长,肿瘤生长抑制作用更明显。但2周后,Talin2 shRNA2基因敲低小鼠肿瘤生长速度缓慢升高。将上述2类荷瘤鼠的肿瘤组织用Western Blot测量,Talin2基因敲低组肿瘤组织的Talin2蛋白质表达水平低于对照组。同时将上述2种细胞传代培养28天后,Western Blot测量同样发现Talin2基因敲低组细胞的Talin2蛋白质表达水平低于对照组。结论:Talin2基因敲低对乳腺癌肿瘤的生长有明显的抑制作用,后期抑制减弱。Talin2基因敲低的人乳腺癌细胞的18F-FDG的细胞结合率降低,肿瘤组织的18F-FDG摄取降低,提示18F-FDGPET/CT可以用来监测Talin2基因敲低疗效与预后。