LGT模型鼠血清及其癌组织提取液中蛋白质指纹比较研究

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目的:分析比较LGT模型鼠血清与肿瘤组织中危重病人预警(LGT-Lost Goodwill Target)蛋白指纹的表达特征。方法:取4-5周龄雌性小鼠1只,接种S180肿瘤细胞悬液(0.2ml/只),建立小鼠S180肉瘤动物模型。肿瘤细胞株S180以腹水瘤形式在昆明(KM)小鼠体内传代,传代后第8天,无菌条件下抽取腹水并以生理盐水稀释,调整细胞密度2*107/ml,制成肿瘤悬液,置于冰浴备用。将制备好的肿瘤细胞悬液以每只0.2ml于昆明小鼠(10只)右腋下的皮下接种造模。随机分为造模组(5只)及对照组(5只),当肿瘤长至0.5cm大小时,开始给予(A组)造模组腹腔注射顺铂5.2mg/kg* 4天;(B组)空白对照组,与A组同天腹腔注射等计量生理盐水* 4天。于造模结束后第三天两组全部给予小鼠摘眼球取血分离血清进SELDI检测,对造模组小鼠进行解剖,分别取瘤组织、瘤旁组织及正常组织各1g,按0.5g组织加入1ml生理盐水,用电动匀浆器匀浆,3000r/min离心5min分离组织液,抽取上清液行SELDI检查。并利用Biomarker Wizard软件对各组血清及瘤组织、瘤旁组织及正常组织匀浆液的蛋白质组指纹图谱进行比较分析。结果:①A组血清LGT蛋白质组指纹阳性,B组血清LGT蛋白质指纹阴性。②A组血清与癌组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有9个蛋白质差异有统计学意义(P<0. 05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为1993,2009,1028,2217,2502,2545,8696,9940,10145。③A组血清与癌旁组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有7个蛋白质差异有统计学意义(P<0. 05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为1077,1211,1994,2009,2030,2081,11817。④A组血清与正常组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有5个蛋白质差异有统计学意义(P<0.05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为1004,1994,2010,2030,2217。⑤A组癌组织液与正常组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有6个蛋白质差异有统计学意义(P<0.05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为2545,3120,3344,4958,5915,7489。⑥A组癌组织液与癌旁组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有6个蛋白质差异有统计学意义(P<0.05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为1224,1994,2030,3120,11817,15167。⑦A组癌旁组织液与正常组织液蛋白质指纹图谱:在检测出的蛋白质指纹图谱中:其中有6个蛋白质差异有统计学意义(P<0.05)。差异蛋白质指纹的m/z分别为2030,4958,5915,7492,10144,11819。⑧位于m/z:11000+H~12000+H的各组区分中被作为潜在的生物标记筛选了出来,从血清组,癌组织组,癌旁组织组到正常组织组,各组中的表达率依次升高:其丰度血清组(3.6),癌组织组(17.9),癌旁组织组(10.2)、正常组织组(63.4)。正常组织液中LGT蛋白质相对含量最高。结论:危重病人预警蛋白指纹蛋白质存在于癌组织、癌旁组织、正常组织中,尤其以正常组织中为高表达(63.4)。本结论认为造成肿瘤恶化而导致死亡发生的因素极有可能不在肿瘤本身,在于周围环境。各个部位所表达的蛋白质指纹也不一致,其与LGT的关系和意义有待进一步研究。
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