铁代谢紊乱在七氟醚和异氟醚致小鼠认知功能障碍中的作用

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目的:本研究拟评价铁代谢紊乱在七氟醚和异氟醚致小鼠认知功能障碍中的作用。方法:清洁级健康雄性昆明小鼠24只,12月龄,体重45~55 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=8):对照组(Con组)、七氟醚组(Sev组)和异氟醚组(Iso组)。Sev组吸入2%七氟醚6 h,Iso组吸入1.4%异氟醚6 h,载气为纯氧,Con组仅吸入纯氧6 h。各组小鼠于麻醉处理前进行Morris水迷宫定位航行训练,历时5 d,每天4次。麻醉结束后12 h再次进行Morris水迷宫实验,通过摄像机和计算机记录各组小鼠水迷宫运动轨迹,逃避潜伏期和寻找平台的总路程。随后,腹腔注射0.4%戊巴比妥钠(1 ml/100 g)麻醉小鼠,剪开胸腔暴露心脏,使用0.9%氯化钠对小鼠进行血液灌流,剪下头部,剥取脑组织,分离出大脑皮层和海马组织。采用Western blot法定性检测各组小鼠皮层和海马区铁代谢相关蛋白ferritin-L、ferritin-H、TfR1、FPN1、DMT1(+IRE)以及磷酸化Tau蛋白表达水平,通过化学发光凝胶成像仪获取相应的蛋白条带图,然后使用Image-Pro Plus 6.0软件分析各蛋白条带的积分光密度值。以目的条带积分光密度值与内参蛋白条带积分光密度值的比值反映目的蛋白的表达水平。采用SPSS13.0软件进行统计分析,以上正态分布的计量资料以均数±标准差(?)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05认为差异有统计学意义。结果:1 Morris水迷宫实验结果:麻醉处理前,三组小鼠寻找平台的总路程和逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05);与Con组小鼠相比,Sev组和Iso组小鼠寻找平台的总路程和逃避潜伏期均延长(P<0.05)。2铁代谢相关蛋白表达水平的检测结果:与Con组相比,Sev组小鼠的大脑皮层及海马中ferritin-L、ferritin-H、FPN1表达均上调,TfR1表达下调(P<0.05),DMT1(+IRE)表达差异无统计学意义(P>0.05);与Con组相比,Iso组小鼠大脑皮层和海马中ferritin-L、ferritin-H、TfR1、FPN1和DMT1(+IRE)的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。3磷酸化Tau蛋白表达水平的检测结果:与Con组相比,Sev组和Iso组小鼠大脑皮层和海马中磷酸化Tau蛋白表达均上调(P<0.05)。结论:七氟醚导致小鼠认知功能障碍的机制与铁代谢紊乱有关,而异氟醚导致小鼠认知功能障碍的过程中并没有铁代谢异常的发生。
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