MC3T3E1细胞成骨分化过程中miR-1及各相关基因的表达

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目的:研究在小鼠前成骨细胞MC3T3E1诱导成骨过程中,miR-1的表达随成骨细胞成熟过程的表达变化,观察ALP、RUNX2和成骨细胞特异性转录因子OSterix(OSX)在成骨细胞成熟过程中的变化。方法:MC3T3E1细胞在B一甘油磷酸钠,抗坏血酸存在的情况下培养7天,在细胞培养的不同时间(0,3,7天),半定量RT-PCR检测miR-1和ALP、RUNX2、OSX mRNA的表达;ALP染色观察矿化结节形成。结果:1.mi R-1随MC3T3E1细胞的分化,表达量逐渐增高。2.MC3T3E1细胞经转染mmu-miR-1a-3p inhibitor后miR-1相对表达量显著降低;经转染mmu-miR-1a-3p mimic后miR-1相对表达量显著提高。3.ALP、RUNX2、OSX mRNA的表达随成骨细胞成熟过程中表达量逐渐增高;细胞经转染mmu-miR-1a-3p inhibitor后,上述与对照组相比表达有所减弱;细胞经转染mmu-miR-1a-3p mimic后,上述与对照组相比表达有所增强。结论:在MC3T3E1细胞的分化过程中,miR-1的表达对早期的成骨分化有一定的促进作用。
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