几种药用植物内生及根际放线菌的分离、鉴定及抗菌活性研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guofy
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四川省甘孜地区生态环境特殊,生长于该地区的药用植物种类繁多。本研究从甘孜不同生态区采集24个药用植物样品,通过可培养和免培养方法对植物内生放线菌及根际放线菌多样性进行研究。同时采用对峙实验分析了放线菌对病原菌的抗菌活性。研究结果表明,多种因素会影响放线菌生长、分布及实验室分离。土壤有机质含量和采样地海拔与放线菌分离数量呈负相关;土壤水分与放线菌分离数量呈正相关;而土壤pH与内生放线菌和根际放线菌分离数量分别呈负相关与正相关。相关统计显示,不同培养基分离所得放线菌数量存在明显差异:柠檬酸盐培养基分离所得放线菌最多,其次为五号培养基和高氏一号培养基。植物内生放线菌在不同器官或组织分布也存在差异:根部分离内生放线菌最多,其次为茎部,叶部最少。基于7种放线菌表形特征,通过加权计算对其多样性进行初探,225株放线菌C值、G值存在一定差异,以(G值,C值)为坐标体系,所有放线菌散点分布较为集中。对植物内生放线菌及根际放线菌RLFP研究分析表明,94株根际土壤放线菌与131株植物内生放线菌酶切图谱具有一定差异,分离所得放线菌多样性较为丰富,但存在不均匀的簇群分布。对部分放线菌测序并构建系统发育树分析表明,测序菌株包括2个属,7个种,其中约85%为链霉菌属。对花苜蓿根茎叶花总DNA变性梯度凝胶电泳分析发现,花苜蓿各器官内生放线菌的群落结构及多样性存在差异,花部多样性指数与丰度均最高。放线菌对病原菌拮抗筛选结果显示,不同放线菌对不同病原菌抑制效果存在明显差异。总体而言,放线菌对西瓜枯萎病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.)抑制效果最好;菌株SCAUSN-2对6种病原菌的抑制明显强于其他放线菌,并对西瓜枯萎病原菌有最大抑制效果。放线菌SCAUSN-2对西瓜枯萎病原菌抑制作用的盆栽实验表明,不同处理后的西瓜苗长势情况差异明显。对不同处理下西瓜苗相关指标统计分析可见,仅喷洒一定浓度西瓜枯萎病原菌菌液处理所有指标偏低,且与其他各处理水平指标存在显著差异。而喷洒放线菌SCAUSN-2菌液处理各指标值偏高,其干预系数IC≥0.5,在很大程度上促进了西瓜幼苗的生长。
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