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当前流行的甲型H1N1流感病毒已蔓延到了全世界很多国家,给人们的生命健康带来了威胁,严重影响了经济发展和社会稳定。及时快速的诊断是有效控制流感疫情大规模爆发的最有效的途径之一。而国内外检验确诊的方法主要有:甲型H1N1流感病毒的核酸扩增,细胞培养的方法分离鉴定甲型H1N1流感病毒,甲型H1N1流感抗原检查,血清学检查等,但这些方法都费时耗力,不适于快速的检验诊断。而目前对病毒检测最有效、最灵敏、最准确的方法就是实时荧光定量PCR。通过对当前流行的甲型H1N1流感病毒及甲型流感病毒的序列进行比对,同时设计了特异性检测甲型H1N1流感病毒的引物探针和检测甲型流感病毒的通用型引物探针。通过应用上述两组引物探针,建立优化实时荧光PCR反应体系,对甲型H1N1流感病毒进行双重检测,检测结果相互验证更加可靠。经试验验证,所建立的检测甲型H1N1流感病毒实时荧光PCR体系,其特异性、灵敏度、精密度良好。并在此基础上建立了同时检测甲型H1N1流感病毒和甲型流感病毒的多重实时荧光PCR体系。为了方便各检验单位的使用,将实时荧光PCR各成分进行有效的组合,开发甲型H1N1流感病毒及甲型流感病毒联合核酸检测试剂盒,经相关单位验证,试剂盒性能良好,符合市场要求。但荧光PCR技术需要昂贵的仪器及专业人士的操作,不适用于基层单位检验,因此在保证国家需求的前提下,我们同时积极创新,结合纳米微粒特有的物理化学性质及PCR的灵敏特异性,开发了核酸纳米金生物传感器技术。通过对当前流行的甲型H1N1流感病毒及甲型流感病毒的序列进行比对,同时设计了特异性检测甲型H1N1流感病毒的引物探针和检测甲型流感病毒的通用型引物探针。将探针分别与纳米金和链霉亲和素偶联,制备了检测甲型H1N1流感病毒及甲型流感病毒的核酸纳米金生物传感器。使用上述两种纳米金生物传感器,对甲型H1N1流感病毒进行双重检测,使检测结果更加可靠。经对实际病毒样品RNA提取、逆转录不对称PCR扩增及核酸纳米金生物传感器的检测,其结果均与事实相符,特异性好。同时核酸纳米金生物传感器技术也为核酸的快速可视化检测提供了一种新方法新思路。