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MicroRNAs(miRNAs)与许多疾病如癌症的发生息息相关,因此有必要高灵敏地检测mi RNA。大部分高灵敏检测mi RNA的方法中常需要酶的参与,由于酶的活性易受外界环境影响,故对样品环境要求较高,这无疑限制了其在复杂生物样品中的应用。针对这一挑战,本文以mi RNA-21为检测对象,基于纳米金颗粒(Au NPs)的表面等离子体共振(SPR)特性构建了以下检测mi RNA的新型传感器,具体如下:1.结合Au NPs和阳离子聚合物,构建了一种检测mi RNA-21的比色方法。由于在低盐条件下单、双链核酸结构对Au NPs均有保护作用,使Au NPs保持分散状态,溶液颜色呈红色。当没有mi RNA-21时,阳离子聚合物-PAH能与单链DNA结合,将单链从Au NPs上竞争下来,使Au NPs失去DNA单链的保护作用而发生团聚,并伴随着颜色由红到紫再到蓝的变化。而当有mi RNA-21时,形成的双链DNA-RNA复合物与PAH的结合力较弱,双链复合物主要以双链形式吸附在Au NPs表面,对Au NPs仍有保护作用,Au NPs保持分散状态,溶液颜色仍为红色。该方法设计简便、无需标记、无需昂贵的检测仪器,用肉眼可以分辨出低至1 n M的mi RNA-21,用紫外可见分光光度计可以检测低至100 p M的mi RNA-21,并且具有较好的选择性。2.基于Au NPs与DNA超级三明治结构增强信号的SPR传感器用于mi RNA-21的检测。在该传感器中,一方面利用Au NPs与金膜的电场耦合效应增强SPR响应信号;另一方面在Au NPs表面组装超级三明治结构,使得金膜表面电介质层的折射率增加,可进一步增强SPR信号。该传感器可检测低至8 f M mi RNA-21,相对直接检测方法而言,其检测限降低了四个数量级。并且该传感器具有较好的选择性、再生性和重现性,可用于血清样品中mi RNA-21的检测。3.基于Au NPs、DNA超级三明治结构及纳米银颗粒(Ag NPs)增强信号的SPR传感器用于mi RNA-21和人肝癌SMMC-7721细胞的检测。在前面工作的基础上,将带正电的Ag NPs嵌入到Au NPs表面的DNA超级三明治结构中以增强SPR信号。该传感器可检测低至0.6 f M的mi RNA-21,具有较好的选择性、再生性和重现性,可用于血清样品中mi RNA-21的检测。更为重要的是,通过结合磁珠和核酸适配体,该传感技术还可扩展至人肝癌SMMC-7721细胞的检测。其检测限为500个细胞,并且具有较好的选择性。该方法有望发展成为一种高灵敏的通用性检测平台。